【摘 要】
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海湾扇贝和栉孔扇贝作为我国优良的海水养殖品种近年来得到了很大的推广,构成了海洋贝类养殖业的主体。尽管我国的扇贝养殖规模在过去的几十年中达到一定水平,养殖总产量也居
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海湾扇贝和栉孔扇贝作为我国优良的海水养殖品种近年来得到了很大的推广,构成了海洋贝类养殖业的主体。尽管我国的扇贝养殖规模在过去的几十年中达到一定水平,养殖总产量也居国际领先地位,但贝类的分子免疫学及其相关的病害防治研究相对国外却相对薄弱,近年来我国养殖扇贝的病害问题一直困扰着该产业的健康和可持续发展。尽管针对扇贝养殖环境、病原以及养殖技术等方面开展了大量的研究工作,提出了许多防病治病措施,也取得了一定的成效。但由于引起养殖扇贝病害的病原和发病原因的多样性,大量使用抗菌素和农药后造成病原微生物抗药性的提高以及对环境造成的严重破坏,所以贝类养殖业要摆脱病害的困扰,必须开辟新的疾病防治途径。本研究从2个方面开展扇贝分子免疫学的工作,一是筛选和克隆了参与调控免疫防御的功能基因,根据抗病功能基因的结构以及这些基因在个体或群体感染后或环境胁迫条件下的表达情况,深入研究扇贝的防御抗病机制,探讨提高机体抗病力的方法和途径,并作为抗病良种选育的分子标记,指导扇贝的遗传改良和抗病品系的培育。二是筛选研制新型的具有抗微生物活性的多肽或蛋白基因,并对这些基因实现体外大量表达,在扇贝养殖业上作为新型的病害预防治疗制剂,取代目前普遍使用的抗菌素和化学药物。 1.栉孔扇贝硒结合蛋白cDNA的克隆与免疫相关性研究 含硒的生物大分子在免疫系统中发挥着重要的作用。本研究采取大规模的EST(Expressed Sequence Tag)测序方法,结合锚定PCR技术克隆得到了1个栉孔扇贝硒结合蛋白的全长cDNA序列。栉孔扇贝硒结合蛋白zSeBP全长1664bp,包括一个33bp的5’末端非编码(untranslated region,UTR)和一个188bp的3’UTR,其开放式读码框(open reading frame,ORF)长1443bp,可编码480个氨基酸组成的zSeBP前体蛋白,预测分子量为54kDa,等电点为6.5。同源性分析表明克隆的zSeBP cDNA序列与哺乳动物、鱼类、鸟类、昆虫甚至微生物和植物的硒结合蛋白基因都具有很高的相似性。这表明从栉孔扇贝中克隆得到的cDNA序列是硒结合蛋白家族的成员比且硒结合蛋
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