原花青素（PAs）是柿中的化合物,赋予果实涩感特征。在植物细胞中,PAs在细胞质内的不同位置合成,而后被运输并最终储存在液泡中。模式植物拟南芥液泡膜P-ATP酶TT13（AHA10,autoinhibited H⁺-ATPase isoform 10）可以驱动原花青素前体转运到液泡中,AHA10在柿中功能尚未得到阐明。本研究以中国甜柿‘鄂柿1号’为主要试材,结合柿转录组数据库,通过同源克隆挖掘到编码ATPase的候选基因DkAHA1,克隆得到DkAHA1启动子序列,通过瞬时转化验证了该基因功能。主要结果如下:1.通过BLAST得到柿AHA基因家族5个候选基因,其中DkAHA1编码长度2853bp。系统发育分析表明DkAHA1属于P_3A型ATPase;氨基酸序列比对表明其保守性较强。2.DkAHA1在柿叶片和萼片中表达量均较高,DkAHA2在果心中表达丰度高,DkAHA3和DkAHA4在叶片中表达量较高,DkAHA5则主要在萼片中表达。DkAHA1在完全甜柿、完全涩柿和非完全甜柿等三类柿品种果实发育各阶段的表达与原花青素在果实中的积累具有相似的趋势。3.烟草亚细胞定位结果显示DkAHA1的绿色荧光与液泡膜蛋白红色荧光可以良好的重合,表明DkAHA1在液泡膜上分布;通过柿圆片瞬时干涉表达和超表达DkAHA1后,原花青素含量表现出相应的降低和上升。4.利用‘鄂柿1号’基因组DNA为模板,克隆获得DkAHA1基因的1132bp启动子序列,预测启动子上具有17个响应环境变化的顺式元件;构建了Y1HGold[p AHA1-Ab Ai]诱饵酵母菌株,其报告基因Ab A^r本底表达最低抑制浓度为600 ng/m L,为调控基因的筛选做铺垫。综上所述,DkAHA1在柿中的表达模式与原花青素积累模式相同,可能参与原花青素的积累过程;DkAHA1作为液泡膜蛋白可促进PAs的积累,可能与PAs前体跨膜转运有关。