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毛囊是皮肤的附属物,是一个相对独立的小器官,由毛乳头、毛母质、毛干、外根鞘、内根鞘、结缔组织鞘组成。新生毛囊具有生长周期,包括兴盛期、退行期以及休止期。本文以野生花鼠为实验材料,利用剃毛和观察毛色变化研究毛再生周期。此外,还研究了季节变化,拔毛等因素对毛周期的影响,并从组织学水平上对花鼠不同生长时期的皮肤毛囊进行了描述。通过免疫组化技术对毛囊干细胞和色素干细胞进行了组织学定位,同时结合组织切片原位杂交技术研究了毛囊周期和色素合成相关基因在毛囊中的表达,为阐明花鼠毛囊生长周期及毛囊色素合成的调节机制奠定了基础。本研究得到如下研究结果:(1)花鼠的毛囊有六种类型:胡须、Guard hair、Awl hair、Auchene hair、 Zigzag hair和尾毛。其中Zigzag hair所占的比例最多。花鼠的尾毛颜色相间最为独特,从毛尖到毛根依次为白色、黑色、黄色和黑色。花鼠的毛囊呈毛囊群结构,花鼠的背部毛色为黑黄相间的条纹,并具有以下毛周期规律:幼年花鼠被毛有一个同步生长的过程,期间又经历2-3个兴盛期,兴盛期非常同步,9月份以后处于休止期,并一直持续到第二年冬眠结束,约6个月。出眠后又进入新一轮的生长周期。冬眠期间,对花鼠进行拔毛,可以诱导拔毛部位的毛囊由休止期进入兴盛期。成年的花鼠周期变得复杂,出现类似小鼠的再生周期波和周期域。组织切片观察到花鼠兴盛期皮肤变厚,且毛囊深入到近皮下组织部位;休止期皮肤变薄,毛囊萎缩,能够观察到得毛囊数量变少,皮肤外表面呈起伏状。(2)CD34和K15在花鼠兴盛期Bulge处有强烈的阳性信号,和小鼠毛囊干细胞的位置相同,因此可作为花鼠毛囊干细胞的标记。BrdU在花鼠毛囊bulge处有阳性信号。PCNA在花鼠毛囊的表皮、外根鞘、毛母质和毛髓质部位都有强烈的阳性信号。Ki67在Bulge处有强烈的阳性信号,在表皮和毛乳头周围的毛母质也有阳性信号。CK14在表皮、外根鞘有阳性信号。β-catenin在毛囊的表皮、外根鞘、内根鞘、毛髓质部位都有强烈的阳性信号,在毛乳头也有阳性信号。(3)扩增了花鼠BMP2、BMP4、Noggin、Pax3、Mitf, MclR基因的外显子片段,以及Agouti基因2.2kb片段。已经制备了BMP2、BMP4、Noggin、Pax3、 Mitf、MclR的反义RNA探针,原位杂交结果显示BMP2和BMP4在花鼠兴盛期毛囊外根鞘以及毛髓质中有弱的阳性信号。(4)花鼠背部毛色呈黄黑相间的条纹状排列,黄色条纹和黑色条纹的毛囊形态和毛发类型以及比例相似,但是黄色条纹的毛囊呈现典型的Agouti毛的特征,即在在黑色毛尖下面有较长的真黄素合成条带,个别没有黑色毛尖;而黑色条纹毛囊的毛发没有真黄素的合成或黄色条带很短。Mart-1、TRP-1和DCT在黄色条纹和黑色条纹的毛囊的毛母质均有表达,色素积累于毛干的髓质层。DCT和Mart-1也在毛囊干细胞的bulge处表达,说明花鼠的色素干细胞和毛囊干细胞共享一个niche, DCT和Mart-1可以作为花鼠色素干细胞的标记分子。