酶法辅助提取琼胶及琼胶寡糖制备与固定化琼胶酶工艺

来源 :集美大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:asgtzyj_lxj
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
江蓠含有丰富的胶质,是我国提取琼胶的重要原料。琼胶用途广泛,其降解产物琼胶寡糖也是一种极具开发潜力的功能性低聚糖。本论文首先利用酶法辅助工艺对江蓠琼胶进行提取。再利用筛选所得产琼胶酶菌株海洋弧菌.NTi(Vibrio sp.NTi)发酵制备琼胶酶,对琼胶酶水解工艺进行优化。然后,根据酶解优化工艺制备不同平均聚合度的琼胶寡糖,并对寡糖的抗氧化及抑菌活性进行考察。最后,制备羧基功能化磁性纳米粒子(CMNPs)应用于琼胶酶的固定化。(1)通过单因素试验对酶法辅助提取江蓠琼胶工艺的相关因素进行探讨,以凝胶强度为主要考察指标,确定了最佳提取条件为碱处理浓度5%,碱处理时间2.5 h,加酶量4 U/mL,酶处理时间2.5 h,酶处理温度45°C,酶处理pH 7.0。在此基础上,进行200 L放大试验,结果表明该工艺具有良好地稳定性与重现性。同时,该试验也证明了江蓠经纤维素酶处理后可降低碱用量而不影响所提琼胶的凝胶强度。(2)为探索琼胶酶水解琼胶的动态过程变化,通过试验确定了琼胶最适水解工艺条件为:水解温度40°C,pH 7.0,底物浓度12 g/L,加酶量为25%,振荡速率120 r/min,反应90 min,在此工艺条件下还原糖生成量达2.18 g/L,平均聚合度最低值(DP)为3。通过20升罐放大试验验证了小试优化工艺条件具有良好的重现性。采用薄层色谱分析酶解产物的降解情况,结果显示在反应48 h后,终产物为二糖及少量的四糖。(3)以不同平均聚合度琼胶寡糖为考察对象,对其抗氧化活性进行研究。平均聚合度3,4,5的琼胶寡糖及BHT对Fe3+的还原能力排序为:BHT>DP3>DP4>DP5,对DPPH·的IC50为14.29 mg/mL,6.65 mg/mL,8.94 mg/mL和0.02 mg/mL,对ABTS·+的IC50为9.07mg/mL,3.04 mg/mL,4.10 mg/mL和0.04 mg/mL。此外,平均聚合度4,5的琼胶寡糖及Vc对·OH的IC50为11.58 mg/mL,11.67 mg/mL,3.10 mg/mL,而聚合度为3的琼胶寡糖对·OH无清除能力。平均聚合度3,4,5的琼胶寡糖及Vc对·O2-的IC50为75.84 mg/mL,24.16 mg/mL,21.38 mg/mL,0.07 mg/mL。通过抑菌圈法测定寡糖的抑菌活性,发现三种不同平均聚合度的琼胶寡糖均无抑菌效果。(4)试验以CMNPs为载体建立了一种新颖、有效的方法对琼胶酶进行固定化。通过试验获得最佳固定化条件为戊二醛浓度4.0%、酶用量1 mL、交联时间2 h,固定化时间1 h,固定化温度4°C。对载体与固定化酶进行表征分析:TEM、SEM显示载体呈规则球状,分散性良好,粒径在12 nm左右;VSM结果显示载体及固定化琼胶酶具有超顺磁性。FTIR显示琼胶酶成功固定在CMNPs表面。与游离酶酶学性质对比分析,琼胶酶固定化后最适温度从50°C下降至40°C,pH从7.5下降至7.0,Km值从为11.3 mg/mL下降6.9 mg/mL,经7次重复使用后酶活剩余38.3%。
其他文献
运用成长小说理论分析简·奥斯丁代表作《曼斯菲尔德庄园》中所具有的成长小说特征,探索这部小说的成长主题,以期证明此书是一部典型的成长小说,从而为读者欣赏这部小说提供
在2017年中国不锈钢行业年会上,中国特钢企业协会不锈钢分会作了《把握机遇乘势作为加快中国不锈钢行业转型升级》的会长工作报告。现刊登其内容如下。$$2017年国家实施供给
报纸
物流信息化是现代物流发展的必然结果,在分析物流企业在现代物流意识、物流信息技术应用、信息资源开发和人才方面存在问题的基础上,指出物流企业应制定科学的信息化发展规划
目的:研究蒲公英总多糖组分及其体外抗炎活性作用,筛选得到蒲公英总多糖的抗炎活性成分。方法:采用水提醇沉法提取得到蒲公英总多糖,通过二乙氨基乙基纤维素52(DEAE-52)柱层析
迷宫螺旋泵是一种高扬程小流量的流体机械,在石油化工、水处理、农业灌溉等行业广泛应用。它可进行单相流、气-液和固-液两相流及气-液-固三相流流体输送,目前关于迷宫泵的多
以联系和服务广大妇女为己任的妇联,具有天然的群众基础,在调动和激发妇女群众积极参与国家治理方面,具有天然优势,不仅群众基础广泛,而且运行方式多以指导、协调与合作为主,更易与
报纸
<正>在西方国家,每年的10月31日,有个Halloween,辞典解释为TheeveofAllSaints’Day”,中文译作:万圣节之夜。一、万圣节的由来:关于万圣节的由来,传说最多的版本认为,那是源
期刊
环氧树脂广泛应用于电子封装材料、印刷电路板及胶粘剂等领域,但因其易燃性,使其应用领域受到限制。固化剂在环氧树脂体系中具有不可替代的重要性,因此研究具有环保意义的无
电力通信系统经过近几年的快速发展,通信方式手段已从单一的载波通信方式发展成为由载波、集群、无线、数字微波、SDH光纤等通信方式共同组成的一个复杂的通信网络,加上在220
聚(3-羟基丁酸酯-co-3-羟基戊酸酯)(PHBV)是一类通过微生物发酵合成的热塑性材料,具有完全的生物可降解性、良好的生物相容性和加工性能,是一种有巨大潜力的环境友好的材料,