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双歧杆菌是人体肠道正常菌群的优势菌,具有增强人体免疫力、延缓衰老、抗肿瘤等多方面的生态效应和保健功能,它的存在直接影响消化道的健康状况.但由于双歧杆菌特殊的生理特性(不耐氧、不耐胃酸、不耐胆汁和不耐高温),易受外界因素的影响,一般均要求在低温下保存和销售,常温下货架期太短,极大地影响该类产品的生产、销售和应用.在经口服通过人体消化道时,绝大部分受胃酸、胆汁和消化酶的作用而失活,仅剩下极少量活性菌到达肠道.针对双歧杆菌特殊的生理特性,该实验采用微胶囊化技术制备新型高效的双歧杆菌微生态制剂.该课题首先分离出几种适用于人体的双歧杆菌,并对它们进行鉴定,测定了其生长曲线及其生长对数期;优化了双歧三联菌混合培养的培养基,其配方是:酵母浸膏0.9﹪,胰蛋白胨0.6﹪,大豆蛋白胨0.6﹪,葡萄糖2﹪,生长因子A0.2﹪,生长因子B 1.0﹪,氯化钠0.3﹪,磷酸二氢钾0.2﹪,牛肉膏0.3﹪,L-半胱氨酸盐酸盐0.1﹪,发酵后发酵液含活菌数高达2×10<10>个/ml以上;双歧三联菌的最优混合培养条件为:培养温度37℃、初始培养基的pH值7.0、发酵时间16h.该课题还研制了复合型的高效活菌冻干保护剂,其配方(以1g湿菌体计算)为:20﹪脱脂奶3ml,麦芽糊精1g,玉米淀粉1g.选用Ess-Ⅱ做囊材.产业化生产出来的三批产品,质量稳定且符合标准,在人工胃液(pH1.5~2.0)中处理2h不崩解,存活率最高可达80﹪以上,每g微囊至少有一百亿个活性菌可顺利通过胃酸进入肠道;在人工肠液(pH6.8)中处理15min,微囊全部崩解释放出活性菌.产品在温度37℃,相对湿度约70﹪的条件下,加速保存试验3个月(相当于常温下保存一年以上),其存活率仍在15﹪以上,活菌数在10<9>个/g以上.常温下留样观察一年后,活菌数比加速试验3个月后还要高,表明经微囊化后的活菌保存性良好.超过预期目标(常温下保存10个月,活菌数在10<7>个/克以上).