在恶性肿瘤中,胃癌的发生率居高不下,是全世界范围内发病率最高的癌症之一,癌症的发生是一个多基因、多阶段、渐进性进行的复杂过程,细胞凋亡、增殖调控异常参与肿瘤的发生和发展,TFF3是主要由胃肠道黏膜分泌的一种小分子粘膜分泌蛋白,在胃肠道黏膜保护及肿瘤形成中的作用逐渐成为大家关心和研究的热点之一;CCT是真核生物细胞质之中唯一的伴侣素,主要帮助新生的蛋白质多肽链完成正确的折叠,从而发挥它们相应的功能,其结合底物目前研究比较透彻的有肌动蛋白、微管蛋白等,而近年来的研究发现各种恶性肿瘤中CCT的表达明显升高,推测CCT在肿瘤的发生发展中也发挥着一定功能。本实验组前期研究通过酵母双杂交的方法正反向验证了TFF3和CCIγ二者的结合,所以我们猜测TFF3是否也是在CCTγ的协助下才得以折叠成具有三叶草结构的小分子肽,从而促进了胃癌的发生发展?因此,本实验首次在胃癌细胞系BGC-823中从分子生物学水平对二者结合性进一步探讨,并初步研究CCTγ对胃癌细胞生物学功能的影响。　　 首先通过构建Myc-CCTγ及HA-TFF3的质粒,利用免疫荧光共聚焦技术探索二者在HEK-293T细胞中的共定位,并采用免疫共沉淀的方法验证二者的结合情况。其次构建CCTγ的干扰质粒,用干扰质粒稳定转染BGC-823细胞,并对获得的稳定干扰CCTγ的细胞株应用RT-PCR和Western-blot检测验CCTγ的干扰效果;并进一步应用划痕实验、Transwell小室实验、CCK-8及流式细胞计数技术分析CCTγ干扰细胞株的迁移、侵袭、增殖能力及凋亡水平的变化,由此考查CCTγ在肿瘤细胞中的生物学作用。　　 通过上述实验,我们发现,TFF3和CCTγ的免疫荧光共聚焦具有空间的共定位,但通过免疫共沉淀实验我们未看到二者明显的结合条带,CCTγ基因沉默后能够明显抑制BGC-823细胞的迁移能力、侵袭能力,生长活性,而凋亡水平上升。这些结论不仅进一步明确了TFF3和CCTγ的相互关系,而且第一次初步探讨CCTγ在胃癌细胞株BGC-823中的生物学功能,从而为胃癌的靶向治疗提供新的方向。