【摘 要】
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目的前列腺癌雄激素非依赖转化机制尚不清楚,本研究尝试构建缺氧诱导的LNCaP细胞雄激素非依赖生长模型,探讨缺氧在前列腺癌雄激素非依赖转化中的作用。内容免疫组化检测前列
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目的前列腺癌雄激素非依赖转化机制尚不清楚,本研究尝试构建缺氧诱导的LNCaP细胞雄激素非依赖生长模型,探讨缺氧在前列腺癌雄激素非依赖转化中的作用。内容免疫组化检测前列腺癌、高级别上皮内瘤、良性前列腺增生和正常前列腺的促红细胞生成素(EPO)和受体(EPOR)表达;构建缺氧诱导的LNCaP细胞雄激素非依赖生长模型,RT-PCR和Western blotting方法检测缺氧诱导的LNCaP细胞雄激素非依赖生长过程中EPO、EPOR和雄激素受体变化。结果只有前列腺癌和高级别上皮内瘤内可有EPO和EPOR同时过表达。LNCaP细胞在10%胎牛血清(FBS)RPMI1640培养液中先培养一周,出现神经内分泌状态;随后雄激素剥夺培养5周获得雄激素非依赖生长。RT-PCR发现持续缺氧雄激素培养LNCaP细胞AR mRNA表达下降,但是EPO、EPOR mRNA表达上调;雄激素剥夺后AR mRNA表达增加,但EPO、EPOR mRNA表达有所下降。Western bloting发现持续缺氧雄激素培养LNCaP细胞AR蛋白表达下降,但雄激素剥夺后AR蛋白获得稳定表达;持续缺氧雄激素培养EPO和EPOR蛋白表达增加,雄激素剥夺后EPO和EPOR蛋白表达进一步增加。结论EPOR的过表达可能是前列腺癌发生的早期现象,前列腺癌存在EPO和EPOR同时过表达说明缺氧在前列腺癌发生发展中有着重要的作用。雄激素剥夺后增强的EPOR/EPO表达提示EPO-EPOR自主分泌环形成的可能,这一自主分泌环在缺氧诱导的前列腺癌LNCaP细胞雄激素非依赖转化过程中可能起着重要作用。
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