【摘 要】
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附睾炎是一种常见的男性泌尿系统疾病,病原菌由尿道逆向进入附睾感染是其主要病因。机体往往由于过度的免疫反应造成组织损伤,精子外溢,最终导致暂时性或永久性不育。视黄酸（RA）是一种免疫调节因子,能够抑制免疫反应,促进免疫耐受的形成。本研究主要探讨了 RA在小鼠急性附睾炎中的功能。首先,通过由输精管逆向附睾尾部注射大肠杆菌,建立了小鼠附睾炎模型,组织切片HE染色和炎症因子mRNA的表达检测结果表明,模型
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附睾炎是一种常见的男性泌尿系统疾病,病原菌由尿道逆向进入附睾感染是其主要病因。机体往往由于过度的免疫反应造成组织损伤,精子外溢,最终导致暂时性或永久性不育。视黄酸（RA）是一种免疫调节因子,能够抑制免疫反应,促进免疫耐受的形成。本研究主要探讨了 RA在小鼠急性附睾炎中的功能。首先,通过由输精管逆向附睾尾部注射大肠杆菌,建立了小鼠附睾炎模型,组织切片HE染色和炎症因子mRNA的表达检测结果表明,模型建立成功。附睾炎模型小鼠腹腔注射RA,组织切片HE染色显示淋巴细胞浸润减少,real-time PCR结果发现炎症因子mRNA水平降低,证明RA对大肠杆菌引起的小鼠附睾炎有减轻炎症的作用。通过real-time PCR和western-blot方法,发现在小鼠附睾炎中,RA能够上调小鼠附睾中免疫抑制因子TGF-β1和IL-10的表达,抑制机体过度免疫反应减轻炎症。免疫荧光定位显示在小鼠附睾中,TGF-β1和IL-10主要表达在小鼠附睾上皮细胞中。对小鼠附睾上皮细胞进行体外培养,角蛋白鉴定结果表明培养细胞中约90%为小鼠附睾上皮细胞。在小鼠附睾上皮细胞培养体系中添加RA,real-time PCR和western-blot结果显示无论在mRNA水平还是蛋白水平,RA都上调了小鼠附睾上皮细胞中的TGF-β1和IL-10的表达。为了确定这种上调作用是否具有特异性,采用了脂多糖预先激活体外培养小鼠附睾上皮细胞模拟体内附睾炎。在脂多糖激活小鼠附睾上皮之后,炎症因子IL-1β和抑炎因子TGF-β1、IL-10的mRNA水平均有所上升,但是在激活后添加RA处理,IL-1β mRNA的表达没有变化,而TGF-β1和IL-10 mRNA表达显著升高。RA的生理学功能主要由其核受体介导,分析RA的主要三种受体表达情况发现,在小鼠附睾组织和小鼠附睾上皮细胞中,主要表达的RA受体（RAR）为RARα和RARβ。通过在体外培养体系中添加RAR特异性抑制剂,检测TGF-β1和IL-10的mRNA水平变化发现RARα抑制剂处理后TGF-β1的mRNA表达不再上调,而RARβ抑制剂处理后RA上调IL-10的mRNA表达部分被抑制,这表明RA上调TGF-β1的表达由RARα介导,RA上调IL-10的表达部分由RARβ介导。同时还检测了小鼠附睾组织和小鼠附睾上皮细胞中RA合成酶与代谢酶的mRNA表达,结果显示在小鼠附睾组织和小鼠附睾上皮细胞中,主要表达RALDH1和CYP26C1。对动物模型和体外培养细胞中这两种酶mRNA表达检测结果提示小鼠附睾上皮细胞在炎症反应过程中通过上调RALDH1表达和下调CYP26C1表达促进RA的合成,提高RA水平,达到机体的免疫稳态。综合以上结果表明,RA通过与不同的受体结合,上调小鼠附睾上皮细胞中的炎症抑制因子TGF-β1和IL-10的表达,减轻附睾炎症反应。
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