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丝裂原激活蛋白激酶p38 (mitogen-activated proteinkinasep38,p38MAPK)是近来新发现的一条信号传导通路,在肿瘤转移过程中倍受注目,该研究拟从VEGF对肝癌细胞转移能力、粘附作用、恶性表型、降解基质纤维等作用中p38MAPK的细胞信号传导通路调控机制进行研究,探讨VEGF在促进肿瘤浸润与转移过程中的分子机制.为探讨VEGF是否通过p38MAPK信号传导通路诱导肿瘤细胞侵袭与转移,人们利用羊膜浸润培养系统及肿瘤细胞转移分析系统计数VEGF诱导肝癌细胞向Boden Chamger下室转移能力,采用Western blot免疫印迹实验测定VEGF诱导肝癌细胞p38蛋白激酶活性,以及应用特异性p38MAPK信号传导通路阻断SB203580后,对VEGF诱导肝癌细胞转移的影响.为探讨VEGF诱导肝癌转移时,p38MAPK信号通路对粘附作用的调控作用,采用鼠尾胶实验、流式细胞术、H<3>-TdR掺入实验、激光扫描共聚焦显微镜(Confocal)观察VEGF诱导肝癌细胞异质性粘附作用、CD44v6表达和同质性附作用、E-Cadherin表达.为进一步探讨VEGF通过p38信号传导通路诱导肝癌细胞转移时,对肝癌细胞恶性表型的影响,采用细胞增殖实验、扫描电子显微镜、激光扫描共聚焦显微镜(Confocal)观察VEGF对肝癌细胞增殖作用、细胞伪足形成、细胞骨架微丝结构的影响以及p38MAPK信号通路调控作用.为探讨VEGF对肝癌细胞溶解基质作用的影响以及p38MAPK信号传导通路的调控作用,采用明胶酶谱分析、激光扫描共聚焦显微镜(Confocal)测定VEGF对肝癌细胞Ⅳ型胶原酶表达和u-PA表达影响以及p38MAPK信号通路调控作用.综上所述,该实验证实肝癌细胞的VEGF分泌增加;VEGF可诱导肝癌细胞向羊膜腔侵润和转移;可降低肝癌细胞同质性粘附作用;抑制E-cadherin表达;诱导肝癌细胞伪足形成,侵袭羊膜能力增加;使肝癌细胞骨架破坏;增加肝癌细胞活化型Ⅳ型胶原酶及u-PA的产生,以上作用是通过p38MAPK信号传导通路介导的,当该通路受到阻断,VEGF不能产生以上作用.VEGF还可诱导肝癌细胞增殖、增强肝癌细胞异质性粘附作用及增加CD44v6表达,上述作用不经过p38MAPK信号传导通路介导,该通路受阻断,以上作用不受影响.总之该文从信号传导通路水平阐明VEGF促进肿瘤转移的机制,为抑制肿瘤转移提出了新思路和新途径.