天然橡胶主要产自巴西橡胶树,巴西橡胶树是海南省主要的经济作物之一。胶乳在乳管中合成储存,次生乳管的数量影响胶乳产量。乳管分化一直被证明与茉莉酸信号途径相关,在该途径中,JAZ蛋白通过与MYC转录因子结合来抑制下游基因的表达,MYC是b HLH类的转录因子,可与G-box顺式作用元件互作。本课题组已在前期研究中证明HbJAZ1与HbMYC3互作,并初步鉴定了MYCs与G-box顺式作用元件的互作。为了进一步筛选鉴定橡胶树JA信号通路中HbMYCs转录因子调控的下游与产排胶相关的靶基因,本实验室通过利用自主开发的生物信息学软件,在橡胶树全基因组水平上筛选启动子上含有G-box元件的产排胶相关基因,最终筛选到40个符合条件的基因。在本篇论文中,我们对其中两个基因REF与HMGR1进行了研究,主要研究内容与结果如下:（1）为进一步验证用于实验的HbREF与HbHMGR1的启动子序列上含G-box（CACGTG）顺式作用元件,我们利用在线启动子分析软件Plant CARE与PLACE对两个目的基因的启动子序列进行生物信息学分析,结果表明,两基因的启动子上均含有G-box顺式作用元件。（2）以橡胶树全基因组DNA为模板,克隆了产胶相关基因HbREF与HbHMGR1的全长启动子序列,大小分别为:805bp与589bp。（3）为验证HbMYCs是否可以与含G-box顺式作用元件的HbREF与HbHMGR1互作,我们利用酵母单杂交试验进行了检验,结果表明:HbMYC2、HbMYC3、HbMYC4均可以分别与HbREF与HbHMGR1互作。（4）为进一步验证HbMYCs与HbREF、HbHMGR1之间的互作,我们利用单荧光素酶报告基因试验进行了检验,结果表明:HbMYC2、HbMYC3、HbMYC4均可以分别与HbREF与HbHMGR1互作,且与HbREF的互作更为强烈。（5）为进一步验证HbMYCs与HbREF、HbHMGR1之间的互作,我们利用双荧光素酶报告基因试验进行了检验,结果表明:HbMYC3、HbMYC4均可以分别与HbREF与HbHMGR1互作,且与HbREF的互作更为强烈。（6）为探究橡胶树四个不同时期橡胶叶片中HbMYCs的表达差异,我们利用RT-PCR技术进行了差异性表达检测,结果表明:从第一到第三时期的MYCs表达量呈现出一直下降的趋势,而在第四时期时,HbMYCs的表达量又有了一个回升。（7）我们想进一步探究Me JA处理四时期橡胶叶片后对MYCs表达量的影响,因此,我们利用RT-PCR技术对Me JA处理后不同时段的四时期叶片进行了差异性表达检测,结果表明:一期叶片经100μM Me JA处理后,MYCs表达量先上升后下降,二期、三期橡胶叶片经100μM Me JA处理后,MYCs表达量先下降后上升,四期橡胶叶片经100μM的Me JA处理后,MYCs表达量趋势不规律。（8）为进一步对HbMYCs基因的功能进行鉴定,我们在拟南芥中进行了表型观察实验,结果表明:myc2/3/4三突变体萌发率明显降低、根长明显缩短、叶片面积减小、植株体型变小,myc2与myc3突变体均有根长加长、叶片颜色变深、表皮毛增加、叶面积变小、早花、株高较高的表型,用HbMYC2互补myc2突变体后,对应表型消失,HbMYC3过表达后,出现相反表型。（9）为进一步证明HbMYCs与HbREF、HbHMGR1之间的互作是在G-box区域进行的,我们设计了启动子上含有G-box元件的短序列,以及突变掉G-box元件的对应短序列,并将这些短序列分别构建在Ab Ai载体上,用于后续单杂实验。（10）为了进一步证明HbMYCs转录因子是通过C端与HbREF、HbHMGR1互作的,我们构建了AD-MYCs C端,AD-MYCs D端载体,用于后续单杂实验。（11）构建了28a-MYCs原核表达载体,为后续EMSA打下了基础。综上所述,我们得出结论:HbMYCs转录因子可以与产胶相关基因HbREF、HbHMGR1互作;Me JA对MYCs的表达量有影响;HbMYC2可以互补拟南芥突变体的表型,与At MYC2的同源性较好;此外,由于根长偏长、早花、表皮毛增加都属于植物抗逆的表型,因此推测,HbMYC2、HbMYC3与植物抗逆相关,这些结论都为橡胶树产排胶机制与茉莉酸信号通路之间的联系提供了更多理论依据。