辣根过氧化物酶(HRP)是一种来源最为广泛而价格较为低廉的过氧化物酶,在过氧化氢或烷基过氧化物存在时能催化有机物的氧传递反应.为了改善辣根过氧化物酶的催化性能,作者在查阅并分析了大量文献的基础上,确立了硕士论文的研究内容.选择了两种化学小分子修饰剂对辣根过氧化物酶进行修饰,深入研究了修饰酶在稳定性、催化性能及耐有机溶剂能力等方面的变化,取得了较为满意的结果.论文的主要内容如下:1.选取了两种化学小分子修饰剂(柠康酐和马来酸酐)对辣根过氧化物酶表面的赖氨酸进行修饰后,发现修饰后的酶不仅没失活,反而在热稳定性、酸碱稳定性方面得到了改善.其中,与天然酶相比,热稳定性提高了大约4-7倍,酸碱稳定性的范围拓宽,而且柠康酐修饰酶和马来酸酐修饰酶的修饰度分别为56.1％和46.7%.从它们在水相中的动力学常数可以判断,与天然酶相比,修饰酶与底物的亲和力大,而且对于酚的去除反应的催化效率高.这就证明了只要选择合适的修饰剂和修饰方法,就能够利用化学方法快速、廉价地提高酶的稳定性.2.在有机溶剂中催化研究,发现修饰酶与天然酶相比,耐有机溶剂(与水互溶)的能力得到了改善,即在有机溶剂中的催化性能得到了改善.尤其当甲醇的含量低于40%时,酶的相对酶活不但不随甲醇含量的增加而降低,反而增加.通过酶在有机溶剂中酶比活和动力学常数的测定,验证了修饰酶耐有机溶剂能力确实是得到了提高.在同一种有机溶剂中,对酶比活、亲和力、催化性能来说:柠康酐修饰酶>马来酸酐修饰酶>天然酶.3.将修饰酶和天然酶用于染料的脱色,通过测定脱色的最佳条件,我们发现相同条件下,修饰酶的脱色效率高于天然酶,尤其是柠康酐修饰酶.并且对溴酚兰来说,几乎可以完全脱色,而对甲基橙来说,脱色率大约在70%~80%.同时我们测定了不同pH值下两种染料脱色的动力学常数,发现动力学常数进一步验证了前面最佳脱色pH的范围,并且与天然酶相比,修饰酶对染料底物的亲和力要大,且对染料脱色的催化效率也要高.