第一部分改良型兔肺VX2肿瘤模型的建立目的:建立适合射频治疗的更理想的兔肺肿瘤模型。材料和方法:新西兰大白兔16只,CT引导下穿刺,将载有VX2肿瘤细胞悬液的P407凝胶接种于右肺内。结果:接种后10-14天,CT检查证实16只新西兰大白兔肺内有肿瘤生长,其中14只呈单发结节表现,直径0.8-1.0cm,兔肺VX2肿瘤模型成功率为100%;另有2只肺内呈多发结节生长,并出现胸腔积液;4只累及纵隔;2只出现胸壁种植转移。接种过程未出现气胸、出血等并发症。结论:本实验模型较以往模型操作简便,避免了悬液外溢导致的肿瘤弥散性生长,减少了并发症,可在肺内局部形成较大体积的实体瘤,能够满足射频治疗肺癌的研究需要,因此所建兔肺VX2肿瘤模型是成功的。第二部分活体兔肺的射频实验研究目的:探讨活体肺组织中在不同起始功率、不同电极直径条件下,射频消融效果的不同,选择适合消融动物模型的电极直径和功率时间组合。材料和方法:采用RF2000型射频治疗机,新型细径穿刺电极,打开最大直径2厘米,频率为465MHz,分别采用电极直径5mm,8mm,11mm,10w、20W、30W的起始功率,梯次增加功率,对正常兔肺射频消融,并用电极自带测温系统实时记录温度。结果:电极直径相同的情况下,不同起始功率,对应消融范围无明显差异,治疗最高温度无明显差异,但消融时间差异明显,起始功率越大时间越短,病理显示10 W起始功率时消融最彻底,30W起始功率时,虽然时间最短,但射频区凝固坏死间隔分布,消融效果不佳。结论:电极直径8 m可以满足兔肺肿瘤射频治疗需要,低起始功率较长的治疗时间射频消融效果最佳。第三部分高温与亚高温射频治疗兔肺内VX2肿瘤的对比研究目的:通过对普通高温射频消融方法的改进,寻找更能充分发挥抗肿瘤效应的射频治疗方法。材料和方法:50只新西兰白免体内建立肺癌模型,随即分为3组:对照组10只,高温射频组20只,亚高温射频组20只。观察动物生存期,射频治疗后肿瘤组织SDH的活性,HSP90的含量,以及静脉血T细胞亚群CD4、CD8、CD4/CD8的水平。结果:射频治疗后72小时两治疗组动物SDH水平均为阴性,亚高温射频组肿瘤组织HSP90明显高于高温射频组,亚高温射频组CD4、CD8、CD4/CD8水平的升高显著高于高温射频组,亚高温射频组动物生存时间也长于高温射频组。结论:亚高温射频治疗灭活肿瘤病灶可靠,同时可激发高水平的抗肿瘤免疫效应,治疗效果优于普通高温射频消融。第四部分树突状细胞对肿瘤射频灭活的辅助治疗作用目的:探讨射频治疗联合应用体外培养扩增的树突状细胞(DC)的抗肿瘤免疫增强作用。材料和方法:无菌状态下取兔骨髓造血干细胞,在重组兔粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子、白细胞介素-4、肿瘤坏死因子α的刺激下,培养为成熟的树突状细胞。荷瘤兔随机分成3组:对照组10只,单纯射频组15只,射频+DC组15只。将成熟的树突状细胞注入亚高温射频治疗后的肺肿瘤病灶,观察各组动物病灶中树突状细胞的浸润情况,周围血IL-2、CD4、CD8水平CD4/CD8比值及动物的存活时间。结果:射频+DC组动物生存时间较单纯射频组延长,周围血IL-2、CD4水平CD4/CD8比值均显著升高。结论:射频治疗联合应用体外诱导培养DC细胞可进一步增强射频治疗所引起的抗肿瘤免疫反应,对兔肺VX2肿瘤具有一定的辅助治疗效果。