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目的:本研究旨在探讨金桔精油在脂多糖诱导的肺炎小鼠与博来霉素诱导的肺纤维化大鼠中的保护作用研究。方法:先建立KEO对LPS诱导的肺炎小鼠的保护作用研究的ALI模型,将雄性KM小鼠72只随机分成溶媒对照(Control)组、LPS组、地塞米松(DXMS)组、KEO(45.5,91,182 μl·kg-1)组,连续给药 7 天(ig),观察各小鼠生理状态,末次灌胃1h后除溶媒对照组外行腹腔注射LPS 10 mg/kg,6h后收集小鼠血液及脏器样本,计算肺质量系数,血生化检测血清肝肾功能指标,HE染色观察肺组织细胞形态及病理变化,IHC-P检测TNF-α、CX-43阳性表达,ELISA检测血清炎性因子IL-1β、IL-6及抗氧化酶SOD、NO表达水平,选用Western Blot检测肺组织Nrf2、iNOS、COX-2、p-NF-κB p65/NF-κB p65、p-p38 MAPK/p38 MAPK、p-IKBα/IκBα 蛋白表达水平。后建立KEO对BLM诱导的肺纤维化大鼠的保护作用研究的PF模型,将雄性SD大鼠120只随机编入溶媒对照(NS)组、BLM组、泼尼松(PDF)组、KEO(31.5,63,126 μ1·kg-1)组,除NS组外行气管内滴注BLM(5 mg/kg,注射体积1mL/kg)诱导大鼠PF模型,次日起灌胃给药,于第14天、第28天收集血样及脏器样本,FCM检测外周血T细胞亚群CD4+/CD8+的表达,血生化检测血清肝肾功能指标,对气管切片行HE染色,肺组织切片用以进行HE和Masson染色,观察细胞形态、病理变化以评估肺纤维化程度;IHC-P检测TGF-β1阳性表达;ELISA检测血清炎性因子IL-1β、LN、HA与肺组织中TNF-α、Col-Ⅲ及抗氧化酶GPx表达水平;Western blotting法检测肺组织中 IL-10、b-FGF、HMGB1、Caspase3、α-SMA、TGF-β1、TRF2、p38 MAPK蛋白表达水平。结果:(1)KEO对LPS诱导的肺炎小鼠的保护作用研究:与Control组比较,LPS组小鼠肺质量系数升高(P<0.001)且肺脏HE染色可见细胞质皱缩、核不规则甚至碎裂、相邻细胞分离及桥复合体支离破碎、血管见大量炎性分泌物(P<0.001),ALB、TP 水平显著降低(P<0.01,P<0.05)。与 LPS组比较,KEO组明显降低肺质量系数,升高ALB至溶媒对照组水平,其中KEO(182 μl·kg-1)组显著升高 ALB 水平(P<0.01)、升高 TP 水平(P<0.05);根据病理切片图像,KEO组明显改善LPS诱导的急性ALI的组织病理学状态,其中KEO(91,182 μl·kg-1)组最显著。经LPS刺激促进血清及肺组织各项炎性因子指标IL-6、IL-1β及肺组织各项炎性因子指标TNF-α、COX-2、iNOS、Nrf2的表达并促进p38MAPK、NF-κB、IκBα的磷酸化进程,抑制肺脏抗氧化系统中SOD、NO表达;经ELISA与IHC-P实验表明KEO(91,182μl·kg-1)剂量组血清 IL-6、IL-1β 和肺组织中 TNF-α、CX-43的阳性表达不同程度降低,同时增加肺脏抗氧化系统中SOD的活力(与LPS组相比,P<0.01),减少NO的释放(P<0.05);经Western Blot实验验证表明KEO(91,182 μl·kg-1)剂量组显著抑制肺组织中p38MAPK、NF-κB、IκBα的磷酸化进程,对肺组织中COX-2、iNOS表达亦有显著抑制效果,上调Nrf2表达水平。(2)KEO对BLM诱导的肺纤维化大鼠的保护作用研究:与NS组比较,BLM组大鼠肺质量系数升高(P<0.05)且气管HE染色可见气管内膜水肿,内膜见梭状核的成纤维细胞,纤维组织增生;肺脏HE染色可见肺泡间隔增宽,细胞质皱缩、核不规则甚至碎裂,部分区域炎症细胞渗出,中央气道和大血管血管几乎撕裂且周围可见大量炎性细胞,Masson三色染色可见多量致密染蓝的胶原纤维;血清ALT水平显著降低(P<0.05)。与BLM组比较,KEO组可降低肺质量系数并升高ALT水平,其中KEO(63,126μl·kg-1)组明显降低28天给药组肺质量系数(P<0.05),显著升高ALT水平(P<0.01);根据病理切片图像,KEO给药组明显改善BLM诱导的PF组织病理学状态,阻止肺纤维化进程,其中KEO(63,126 μl·kg-1)组最显著。经BLM刺激促进血清IL-1β、HA、LN及肺组织Col-Ⅲ、TNF-α IL-10、b-FGF、HMGB1、Caspase3、α-SMA、TGF-β1、TRF2、p38 MAPK 的表达,抑制肺脏抗氧化系统中GPx表达,降低CD4+/CD8+比值;FCM检测发现,与BLM组相比KEO组可不同程度提高CD4+/CD8+比值(28天组P<0.01),经ELISA与IHC-P实验表明KEO(63,126 μl·kg-1)剂量组可明显抑制血清IL-1β、HA、LN和肺组织中TNF-α、Col-Ⅲ的阳性表达(与BLM组相比,P<0.05),同时肺脏抗氧化系统中GPx均呈上升趋势(与BLM组相比,P<0.01);经Western Blot实验验证表明KEO(63,126μl·kg-1)剂量组显著抑制肺组织中 IL-10、b-FGF、HMGB1、Caspase3、α-SMA、TGF-β1、TRF2、p38 MAPK蛋白表达水平,其中第14天给药组相对第28天给药组更显著。结论:研究表明,KEO显著改善LPS所致肺损伤,作用机制为通过阻断p38MAPK 与 NF-κB、IκBα 通路介导抑制 COX-2、iNOS、IL-6、IL-1β、TNF-α、CX-43的表达,增强抗氧化因子SOD的活性,上调Nrf2的表达,减少信使分子NO释放,减少氧化损伤。同时金桔精油可明显阻止BLM诱导的肺纤维化进程,通过抑制 IL-1β、HA、LN、TNF-α、Co1-ⅢIL-10、b-FGF、HMGB1、Caspase3、α-SMA、TGF-β1、TRF2因子的表达,减少胶原沉积,提高抗氧化酶GPx活性,通过提高CD4+/CD8+比值增强机体免疫系统免疫力,从而对抗肺纤维化的发生与发展。提示金桔精油对肺部疾病ALI、PF有良好保护作用,多靶点多途径把控各调控通路减少肺损伤,抑制肺纤维化。