PLGA/I型胶原/壳聚糖复合人工硬脊膜的研制及其相关研究

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目的应用生物相容性良好材料聚乳酸/乙醇酸共聚物(PLGA)、I型胶原和壳聚糖,研制出新型的复合生物硬脊膜作为理想的硬脊膜修复材料。方法应用分子量为5万的PLGA共聚物使用溶剂浇铸/粒子浸出法制作出多孔PLGA支架(P膜),然后在多孔PLGA支架的表面层复合9:1和5:5比例的I型胶原和壳聚糖材料,分别制作出PGC(5:5)膜和PGC(9:1)膜,然后在PGC(9:1)膜按100u/cm~2加入bFGF制成bPGC(9:1)膜。进行材料的吸水率、接触角、孔隙率、力学性能、扫描电镜、细胞毒性实验及细胞增殖实验检测。并从中选择出力学性能满意和生物相容性佳的材料的PGC(9:1)和bPGC(9:1)膜备用。设计出硬脊膜损伤修复动物模型,并用PGC(9:1)膜、bPGC(9:1)膜及自体筋膜修复硬脊膜。术后1、2、4和16周随机处死取材,肉眼、光镜HE染色检测、透射电镜检测及I型胶原、bFGF和IL-6的免疫组织化学检测,观察疤痕组织修复、材料与脊髓组织粘连、炎性细胞浸润及I型胶原、bFGF和IL-6表达情况。结果PGC膜及bPGC膜力学性能及生物相容性优于PLGA膜。在动物实验中应用非缝合技术,PGC(9:1)和bPGC膜(9:1)成功地修复了硬脊膜缺损。两种合成修复膜较自体筋膜的炎性反应较明显,但与脊髓组织粘连较后者轻,P<0.05。与其它两种材料相比,PGC膜抑制了I型胶原蛋白的表达,而bPGC(9:1)与自体筋膜组差异无统计学意义。bPGC(9:1)材料中的bFGF在1—2周内均有表达,4周时未见表达。结论通过I型胶原、壳聚糖改性的多孔PLGA材料,可以改变材料的力学性能及生物相容性,其中PGC(9:1)和bPGC(9:1)材料的性能较佳。PGC材料植入机体后,组织的炎性反应较自体筋膜明显,但亦可以达到满意的修复硬脊膜的效果。PGC材料中加入适量的bFGF,可以促进成纤维细胞的增殖与分化,促进硬脊膜组织的修复替代。
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