苦马豆素的提取及其抗肿瘤作用机制的研究

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苦马豆素(SW)是一种水溶性的吲哚类生物碱,长期以来一直是研究糖蛋白N-连接寡糖合成的工具药。最初从澳大利亚苦马豆属植物Swainsona canescens的果实和北美疯草中分离得到,国内SW多从棘豆属植物中提取获得。甘肃棘豆是棘豆属植物品种之一,其分布面积广,营养价值高,但毒性也很强,严重威胁着草原畜牧业的发展。国内的研究多集中在SW的提取、分离以及毒性的研究,而对SW的抗肿瘤作用及其机制的研究目前还不多。本课题即从甘肃棘豆中提取分离到的SW为研究对象,采用体外培养瘤细胞系和体内荷瘤动物模型的方法,探讨和揭示SW对肝癌和胃癌的抗肿瘤的作用及其机制。研究证实其体内外对肿瘤的生长有很好的抑制作用,为SW作为一种新型的抗肿瘤药物进入临床获得进一步的实验依据。 实验共分三部分进行: SW的提取及含量测定:实验中我们对甘肃棘豆干草粉采用甲醇提取,酸溶解并通过强酸性阳离子交换树脂,碱液洗脱的方法洗脱,得到的总生物碱依次用甲醇和氨性氯仿重复溶解,残留物研磨均匀后上硅胶柱,氯仿、甲醇、氨水、水体积比为70:26:2:2混合溶剂洗脱,根据TLC实验结果,合并同类部分,挥干后在90℃,-0.094Pa真空条件下升华,得SW单体。之后利用薄层扫描双波长扫描方法,采用硅胶G板,氯仿:甲醇:氨水:水(体积比70:26:2:2)为展开剂,λ_s=560nm,λ_R=700nm,对所得SW结晶进行含量测定。结果表明SW含量在0.3464~1.7320μg范围内,浓度同斑点面积积分值呈良好线性关系。回归方程为A=2790.993X-554.44r=0.997,平均回收率为99.15%,精密度试验RSD%为1.95%(n=5)。
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