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目的探讨索拉菲尼联合阿霉素秩序给药对肝癌细胞HepG2的影响及其机制,为临床治疗肝癌提供新的理论依据。方法选择肝癌HepG2细胞,进行以下药物作用研究:1、索拉菲尼和阿霉素分别按不同浓度梯度（0、1、2、5、8、10μmol/L）、（0、1、2、4、6、8μmol/L）处理肝癌HepG2细胞,MTT检测不同浓度索拉菲尼和阿霉素对细胞HepG2活力的影响,以药物浓度梯度为横坐标,细胞活力为纵坐标绘制药物-效度曲线图,并计算出索拉菲尼和阿霉素的IC50值,筛选以下实验药物作用浓度。实验设置空白对照组（Control）、索拉菲尼2μmol/L组（Sorafenib）、阿霉素1μmol/L组（Adriamycin）、联合秩序给药组,联合秩序给药组为:索拉菲尼和阿霉素共同给药组（Combination）、索拉菲尼作用1小时后加入阿霉素组（S1A）、索拉菲尼作用4小时后加入阿霉素组（S4A）,同等原理设置S6A、S8A、A1S、A4S、A6S、A8S;MTT检测各组药物作用后细胞活力,筛选出秩序给药组（S6A）效果最明显组进行实验。2、索拉菲尼和阿霉素单独或联合秩序给药对细胞增殖的影响。观察各组细胞克隆形成能力,测定单独或联合秩序给药对各组细胞增殖的抑制作用;Western Blot检测各组增殖相关蛋白p-AKT、AKT、p-ERK、ERK的表达水平。3、索拉菲尼和阿霉素单独或联合秩序给药对细胞凋亡的影响。各组药物作用48小时,Hoechast33342染色观察细胞核形态,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,Western Blot检测凋亡蛋白Bax、Bcl-2的表达水平。4、索拉菲尼和阿霉素单独或联合秩序给药对细胞侵袭、迁移的影响。Transwell侵袭、迁移实验检测各组药物作用后细胞的侵袭、迁移能力,细胞划痕实验检测各组细胞迁移能力,观察索拉菲尼和阿霉素单独或联合秩序给药对细胞侵袭、迁移的影响。5、ROS试剂盒检测索拉菲尼和阿霉素单独或联合秩序给药对细胞ROS水平的影响,JC-1试剂盒检测对细胞线粒体膜电位的影响。结果1、索拉菲尼和阿霉素浓度梯度依赖性降低HepG2细胞活力,索拉菲尼IC50值是5.003umol/L,阿霉素IC50值是2.665μmol/L。与单独用药组相比,联合用药组（Combination）较好抑制细胞活力（P<0.05）;与单独用药组和联合用药组（Combination）相比,联合秩序给药组（S6A）明显抑制细胞活力（P<0.01）,差异具有统计学意义。2、S6A组明显抑制细胞克隆形成能力,与单独给药组、联合用药组、A6S组相比,差异具有统计学意义（P<0.01）。Western Blot结果显示S6A组明显降低p-AKT、p-ERK蛋白表达水平,对AKT、ERK蛋白表达没有影响,与单独用药组、联合用药组（Combination）、A6S组相比,S6A组明显抑制增殖蛋白的表达水平（P<0.01）。3、S6A组明显引起凋亡细胞核形态改变,Hoechst33342染色观察S6A组细胞核浓缩、明亮,较单独给药组、联合给药组（Combination）、A6S组细胞核变化明显。细胞流式术检测细胞凋亡率,索拉菲尼组（Sorafenib）细胞凋亡率（12.1±0.9）%,阿霉素组（Adriamycin）细胞凋亡率（13.7±0.6）%,联合用药组细胞凋亡率（25.2±1.1）%,A6S组细胞凋亡率（25.9±0.9）%,与以上各组相比,S6A组凋亡率（36.8±0.5）%明显升高（P<0.05）,差异具有统计学意义。4、观察Transwell侵袭、迁移实验和细胞划痕实验,与各药物组相比,S6A组明显抑制细胞侵袭和迁移能力（P<0.05）,差异具有统计学意义。5、S6A组明显提高细胞ROS水平,与各组相比ROS产物明显增多（P<0.05）,差异具有统计学意义;JC-1结果显示红绿光比例明显降低,线粒体膜电位显著下降。结论1、S6A组抑制HepG2细胞增殖、侵袭、迁移能力,促进凋亡,与各药物组相比,效果最明显。2、索拉菲尼和阿霉素联合秩序给药提高细胞ROS水平,降低细胞线粒体膜电位,对细胞产生影响。