IL-6、TLR3基因多态性及表达水平与儿童肠道病毒71型脑炎的相关性研究

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目的:观察IL-6-572C/G(rs1800796)及IL-6-174G/C(rs1800795)基因多态性与EV71感染的手足口病患儿临床特征的相关性,探索不同基因型对IL-6表达的影响,探讨不同基因型与EV71感染严重程度、脑炎易感性之间的关系。方法:收集2013年7月到2013年9月青岛大学医学院附属妇女儿童医院及青岛大学附属医院EV71感染患儿187例。根据是否存在中枢神经系统并发症,分为EV71脑炎组(59例)和EV71感染无脑炎组(128例)。收集同期在上述医院健康体检的儿童(232例)作为正常对照。记录基本临床资料及实验室参数,收集外周血样本,应用限制性片段长度多态性聚合酶链反应技术(polymerase chain reaction-restricted fragmentlength polymorphism,PCR-RFLP)对IL-6-572C/G及174 G/C基因多态性进行检测,采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assa,ELISA)测定血清或者脑脊液中IL-6浓度。结果:1、与EV71感染无脑炎组(128例)相比,EV71脑炎组(59例)具有更高的IL-6-572GG/GC基因型(40.7 vs.15.6%,OR=3.70,95%CI=1.83–7.51,P=0.001)。IL-6-572 G等位基因的频率亦呈现类似结果,EV71脑炎组IL-6-572 G等位基因的频率较EV71感染无脑炎组显著升高(23.7 vs.8.6%,OR=3.31,95%CI=1.80–6.08,P<0.001)。2、对IL-6-174 G/C位点的检测,无论在EV71感染组,还是正常对照组,均仅出现了GG基因型,未见CG及CC基因型,提示在本组人群中未见IL-6-174位点基因多态性。3、IL-6浓度与IL-6-572C/G基因型之间的关系:在EV71感染组,G(GC+GG)等位基因携带者(195.1±11.8 pg/ml)血清IL-6浓度比CC纯合子(167.7±6.7 pg/ml)显著升高(p<0.001),但是在正常对照组,不同的基因型之间血清IL-6浓度无统计学差异。EV71感染患者血清IL-6浓度明显高于正常对照组。EV71脑炎组CG/GG基因型(217.1±25.4 pg/ml,n=10)与CC纯合子(205.2±30.5 pg/ml,n=10)相比脑脊液IL-6浓度无显著性差异。4、血CRP浓度与IL-6-572C/G基因型之间的关系呈现相似的趋势。在EV71感染组与EV71脑炎组中,G等位基因携带者(GC+GG)血CRP浓度较CC纯合子明显升高(P<0.01)。在EV71感染组,G(GC+GG)等位基因携带者(8.61±2.69 mg/l)血清IL-6浓度比CC纯合子(7.15±2.79mg/l)(p=0.003)显著升高。而且,在EV71脑炎组,G等位基因携带者(GG+GC)(10.6±1.29 mg/l)血CRP水平较CC纯合子(9.31±1.93 mg/l)显著升高(p=0.005)。5、与CC纯合子(medians of 7.8×109/l)相比,G等位基因携带者(GG+GC)白细胞计数(median of 13.3×109/l)显著升高(P<0.001);血糖浓度两组亦有统计学意义差异,G等位基因携带者(median of 6.8 mmol/l)较CC纯合子(median of 10.4mmol/l)显著升高(P=0.006)。与CC纯合子相比,G等位基因携带者发热持续时间明显延长(P<0.001)。然而,在性别、年龄、ALT、AST、CK-MB及病毒载量方面,两组无显著性差异(P>0.05)。结论:1、IL-6-572C/G位点的基因多态性可能是EV71脑炎的易感因素。2、IL-6-572位点G等位基因增加了EV71脑炎发生的危险性。3、IL-6-572 G等位基因可上调血清IL-6的表达,血清IL-6浓度的升高进而可调节血CRP的水平。4、本组人群中未发现IL-6-174G/C基因多态性。目的:观察TLR3-1377C/T位点基因多态性与EV71感染的手足口病患儿临床特征的相关性,探索血清TLR3与EV71感染严重程度、脑炎易感性之间的关系。方法:收集2013年7月到2013年9月青岛大学医学院附属妇女儿童医院及青岛大学附属医院EV71感染患儿187例。根据是否存在中枢神经系统并发症,分为EV71脑炎组(59例)和EV71感染无脑炎组(128例)。收集同期在上述医院健康体检的儿童(232例)作为正常对照。记录基本临床资料及实验室参数,收集外周血样本,采用聚合酶链反应限制性片段长度多态性(polymerase chain reaction-restricted fragmentlength polymorphism,PCR-RFLP)对TLR3-1377C/T基因多态性进行检测,采用酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assa,ELISA)检测血清TLR3浓度。结果:1、与EV71感染无脑炎组相比,EV71感染脑炎组TLR3-1377C/T位点基因型分布及等位基因的频率无显著性差异。2、血清TLR3与IL-6水平及病毒载量的检测:与正常对照组(15.23±2.09ng/ml)相比,EV71感染脑炎组(26.75±4.23ng/ml)及无脑炎组(35.64±6.65ng/ml)血清TLR3水平均显著高(t=11.03;t=18.39),但EV71脑炎组(26.75±4.23ng/ml)血清TLR3水平显著低于EV71感染无脑炎组(35.64±6.65ng/ml)(t=18.39);EV71感染患者血清IL-6浓度明显高于正常对照组,且EV71脑炎组(212.3±7.1pg/ml)血清IL-6浓度明亦显著高于EV71感染无脑炎组(168.2±5.8pg/ml)(t=25.99);EV71脑炎组(4.0±0.4 log10 copies/μl)血EV71病毒载量较EV71感染无脑炎组(3.2±0.5log10copies/μl)高,两者比较有显著性差异(t=7.376,P<0.001)。3、不同年龄组别中血清TLR3水平的检测:EV71脑炎组和无脑炎组血清TLR3水平在不同年龄组别中均较相应正常对照组显著高(<1岁组:脑炎组vs对照组t=2.791,无脑炎组vs对照组t=6.66;≥1岁组:脑炎组vs对照组t=7.288,无脑炎组vs对照组t=11.92),但各年龄组中EV71脑炎组血清TLR3水平较相应无脑炎组明显低(<1岁组:t=4.638;≥1岁组:t=2.315),EV71脑炎组TLR3水平<1岁组患儿显著低于≥1岁者;而与相应<1岁组相比,≥1岁组EV71感染无脑炎组及正常对照组TLR3浓度均无显著性差异。结论:1、本研究未发现TLR3-1377C/T位点的基因多态性与EV71感染及脑炎的发生存在相关性。2、EV71感染后血清TLR3的低表达可能导致其对病毒复制的抑制作用减弱,从而促进了EV71脑炎的发生。3、EV71脑炎组血清TLR3的表达存在年龄差异,婴儿EV71感染后血清TLR3的表达不足可能是EV71感染合并脑炎的重要因素。
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