雨生红球藻对UV-B辐射的响应及HpUVR8的功能研究

来源 :山西农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhusanhuiit
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
UV-B是太阳光谱重要组成,不但是植物逆境胁迫因子也是信号调控因子,严重影响植物生长及代谢。UVR8是一类非发色团结合的独特紫外光受体,其介导的信号通路在UV-B响应中发挥重要作用。伴随着地球UV-B辐射的动态变化过程,微藻进化出抵御不同强度UV-B辐射的多种生理机制,是研究UV-B响应的理想种质材料。尽管UVR8广泛存在于高等植物和真核绿藻中,但在真核单细胞绿藻中研究较少。雨生红球藻(Haematococcus pluvialis)是生产天然虾青素的理想种质。UV-B辐射可显著促进其体内虾青素的积累,然而藻细胞如何感知转导紫外光信号进而发挥调控作用尚不清楚。为此,本研究在前期克隆获得雨生红球藻HpUVR8同源基因的基础上,首先对雨生红球藻响应UV-B辐射的生理特征与转录组进行系统分析,然后利用拟南芥和烟草对HpUVR8的生理功能进行鉴定,最后利用酵母双杂交系统对HpUVR8光受体介导的信号通路中互作蛋白进行筛选,以期为从UVR8光受体角度解析UV-B诱导虾青素积累的调控机制奠定科学基础。主要研究结果如下:1.雨生红球藻在UV-B辐射胁迫下生长、生理及生化表型的鉴定。结果表明,不同剂量的UV-B辐射(100-500 lx)均能抑制雨生红球藻的生长,降低叶绿素的含量和光合效率,但显著诱导虾青素的积累。同时UV-B辐射可显著上调HpUVR8基因及虾青素合成相关基因(IPI、PSY、BKT、BCH)的表达。2.雨生红球藻在UV-B辐射胁迫下转录组数据的分析。雨生红球藻正常光照和不同剂量UV-B辐射下的转录组数据表明,雨生红球藻对不同强度UV-B辐射的响应机制不同。与对照组(L)相比,低剂量组(L200)通过激活DNA损伤修复、核苷酸切除修复和同源重组等修复机制抵御UV-B损伤;而高剂量组(L400)通过增强脂肪酸代谢、脂肪酸合成和虾青素合成等抵御UV-B损伤。进一步差异基因表达分析发现,UV-B诱导了雨生红球藻虾青素合成和UV-B信号通路相关基因的上调表达,暗示HpUVR8介导的信号通路参与UV-B诱导虾青素的积累。3.雨生红球藻HpUVR8光受体的功能验证。烟草瞬时转化和拟南芥Atuvr8突变株功能互补试验表明,雨生红球藻HpUVR8定位于细胞核。在烟草中过表达HpUVR8基因激活类胡萝卜素和叶绿素合成相关基因提高二者含量,最终增强对UV-B辐射的耐受性。通过异源表达HpUVR8能部分恢复拟南芥uvr8突变体的发育缺陷及光形态建成,包括下胚轴伸长和色素变化等表型。同时引起UV-B信号通路关键基因(UVR8、COP1、HY5和RUP1)的差异表达。上述结果表明雨生红球藻HpUVR8光受体与高等植物已知的UVR8光受体功能存在一定保守性。4.雨生红球藻HpUVR8的互作蛋白筛选。基于构建的HpUVR8诱饵载体对雨生红球藻UV-B辐射下的c DNA酵母文库进行筛选,获得70个互作蛋白,进一步对其中3个功能注释完整的蛋白(C3H1和Tbc等转录因子及细胞色素氧化酶P450s)进行鉴定。这些互作蛋白响应多种逆境胁迫,暗示HpUVR8光受体可能通过与上述互作蛋白形成通路进而调控UV-B辐射的响应。本论文系统鉴定了雨生红球藻对UV-B辐射响应的生理生化表型,同时采用转录组学揭示了UV-B辐射下的表达差异基因富集模式,利用烟草和拟南芥体系验证了HpUVR8在UV-B辐射响应中的可能功能,并对其介导信号通路的互作蛋白进行初步研究,为雨生红球藻中UVR8信号通路的深入研究奠定了基础,同时为揭示UV-B辐射诱导虾青素积累的转录调控机制提供了新视角。
其他文献
<正>农业兴、产业旺、乡村美,这是国家倡导,也是百姓期许。他生在农村、长在农村、奋斗在农村,在2007年完成学业后,毅然选择返乡创业。十几年来,他挖掘资源优势,创新带贫机制,用实际行动助力脱贫攻坚。他就是唐县政协委员、新时代唐县乡村振兴好青年、保定振宏食品股份有限公司董事长刘静盼。
期刊
叶片衰老是植物生长发育的最后阶段,涉及能量的转化及养分回运,影响作物的产量和品质。适宜的衰老起始和进程能够有效提高作物产量,增强作物对环境的适应性。因此,发掘衰老相关基因的优异等位变异、开发功能标记、解析其作用机理,不仅能为小麦高产育种提供新的基因资源,而且对分子标记辅助选择高产小麦品种具有重要意义。课题组前期通过转录组数据筛选到一个衰老相关基因TaSAG39,克隆了该基因编码区序列。在此基础上,
学位
路面结构动力响应研究是合理设计路面的必要理论基础,目前我国现行的路面设计规范依旧将静荷载下的各向同性弹性多层体系作为路面的力学模型,并假设其层间接触状态为完全连续。实际情况下,路面结构各层材料具有明显的各向异性属性,且层间接触状态通常并非完全连续,尤其是路面结构与地基之间的接触面。针对以上问题,本文考虑路面结构层与地基之间的不完全连续接触状态,基于积分变换方法提出了求解横观各向同性层状路面结构在落
学位
粗颗粒土如中粗砂、碎石土等,是由石英、长石等坚硬的原生矿物颗粒通过接触联结形成的无黏性粒状土体。万物皆流,粗颗粒土的流变问题涉及水利水电工程、交通工程、房屋建筑工程和地质灾害等诸多国家重点发展领域,如水利水电工程中高石坝的长期稳定和耐久性问题;交通工程、房屋建筑工程高应力下地基的长期强度和变形及长期健康运行问题;大型边坡的长期稳定性问题等。目前对于粗颗粒土的流变研究工作主要集中在宏观流变特性方面的
学位
维生素E是人体必需的微量营养物质,对维持人体正常生理活动具有重要作用。大豆是天然维生素E的一个重要来源,因此提高大豆种质资源维生素E含量成为近年来大豆育种工作的一项热门课题。本研究以188份大豆自然群体为试验材料进行全基因组关联分析,挖掘与大豆籽粒维生素E及其组分含量相关的位点以及候选基因;从中筛选出富含维生素E的大豆种质;并且对极端材料的γ-TMT3(Glyma.09g222800)基因进行克隆
学位
迅速增长的人口强调了增加粮食生产的必要性,土壤盐碱化对粮食安全构成威胁,因此急需在改良盐碱地的同时开发其生态和经济价值。尽管藜麦具有优异的抗逆性且兼具高营养价值,是公认的实现盐碱地高值化综合利用的优良作物,但是也需要进一步提高藜麦在盐碱地中的产量。微藻是一大类能够进行光合作用的单细胞生物,含有多种生物活性物质,兼顾生物肥料与生物刺激剂的双重功效。但是,微藻在盐碱地改良及对作物在盐碱地中的促生效果未
学位
钢板组合剪力墙由于自身良好的刚度、强度和稳健的滞回循环,因而被广泛用为高层建筑结构中的抗侧力构件。基于此,本文提出一种可实现装配化施工的新型双钢板混凝土组合剪力墙,该剪力墙结构通过“L”形钢板把剪力墙内部分成一定数目的空腔,再在空腔内部填充混凝土,两者共同组成装配式新型双钢板混凝土组合剪力墙结构。该剪力墙结构能构充分结合两种材料的力学性能特点,具有良好的抗震性能,是一种性能优越的抗侧力构件。本文将
学位
苦荞[Fagopyrum tataricum(L.)Gaertn]营养价值高,富含蛋白质和黄酮类物质,是一种典型的药食两用小杂粮作物。生产上由于落粒性、易倒伏、脱壳难以及结实率低等因素,限制了苦荞产业的发展。因此针对苦荞壳的厚度相关研究,培育薄壳和裂壳(均为易脱壳表型)品种已成为苦荞育种家和苦荞加工企业的共识。本研究利用EMS诱变苦荞‘黑丰1号’(种壳不开裂)获得的裂壳突变体ftch作为实验材料,
学位
现如今在全球变暖大背景下,干旱对作物危害将更加剧烈且持久。谷子抗旱、耐贫瘠,是我国重要的杂粮作物之一,但在近年来干旱胁迫也同样严重制约着它的生长发育和产量形成。所以挖掘谷子抗旱基因,深入探究谷子抗旱机制,提高谷子抗旱性仍是亟待解决的问题。本研究对抗旱性强的谷子品种豫谷1号(YG1)和沁黄2号(QH2)以及干旱敏感型的谷子品种安-04(AN-04)在田间自然干旱胁迫状态下昼夜不同时间点进行取样,分析
学位
车辆荷载是桥梁运营过程中的主要荷载。随着汽车运输的高速化和重载化,车辆荷载对桥梁结构安全的研究成为了桥梁工程中的一个重要课题。车辆荷载和桥梁振动存在耦合作用,两者相互影响,车桥耦合作用下的动力响应远大于静力响应,是导致桥梁结构损伤、疲劳和开裂的主要因素之一。冲击系数是车桥耦合效应的重要参数之一。《公路桥涵设计通用规范》中,冲击系数的计算明确了桥梁振动频率是车桥耦合效应最直接的影响因素。对于桥梁振动
学位