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应激性溃疡(SU)是严重身心应激的常见并发症。病理研究显示：SU常表现为表浅但广泛的糜烂。应激因素持续存在时，病情常呈进行性力重；如及 时解除应激因素，粘膜病变可逐渐恢复至正常状态，而无疤痕形成等结构改变。这对传纺观念认为的应激因素作用于胃粘膜造成细胞被动降解、坏死，进而形成溃疡的理论提出挑战。研究发现，生理、病理状态下，还存在一种与被动坏死不同的、由基因调控、耗能的主动死亡过程，该过程中形成的凋亡小体，为临近细胞吞噬，不伴有炎症反应。正常胃粘膜细胞存在凋亡，它与细胞增殖共 同调节着胃粘膜结构和功能的稳态。进一步研究在朋Bcl-2/Bax，Fas/Fas-L基因 的表达与凋亡的发生关系密切。应激状态下，大鼠胃粘膜细胞的死亡形式及其发生机制，目前仍不明确。在胃粘膜遭受到应激性损伤时，胃粘膜细胞相互之间通过局部的信息传递所做出的快速、应激性反应，可能是维护细胞功能的重要因素。NO是一种可在细胞间进行快速、广泛信息交换的小分子化合物，能通过不同途径对细胞凋亡迸行精细调节。此外，细胞间信息传递还可通过细胞膜上的特殊区城-细胞间隙连接来完成。结构连接蛋白43(CX43)是主要的细胞间隙连接蛋白之—。应激性溃疡发生发展过程中，这些与信息传递有关的因子的表达变化以及与胃粘膜细胞改变的关系，尚未见报道。对其机制的研究，就是对其防治提供更有力的理论依据，目制临床常用防治消化系溃疡的药物对应激牲溃疡的防治疗效以及胃粘膜细胞完整性的维护作用如何，不甚明确。 本课题分四部分，研究应激性溃疡发生发展过程中大鼠胃粘膜的形态学、生化改变及其调控机制。 一、应激性溃疡模型的制备 本实验参考Brodie的方法制备大鼠水浸-束缚应激(WRS)溃疡模型；观察WRS 2h、3.5h、WRS结束后2h、5h、8h、12h、24h，树间点胃粘膜损伤情况，按Guth标准评估胃粘膜损伤溃疡指数(UI);并于光镜下观察组织病理学改变。结果：对照组大鼠胄粘膜未见损伤性政变，光镜下可见表层上皮结构完整；WRS2h大鼠胃粘膜充血，腺胃部有散在点状出血点，镜下可见粘膜层充血、水肿，少量上皮细胞脱落WRS 3.5h～WRS结束后2h，大鼠胃粘膜面附有大量血痂，腺胃部弥漫点线状出血灶，UI达最高值(P<0.01)，镜下可见 粘膜表层上皮细胞受损、雌，中断，腺体结构郊L，其间有大量红细胞聚桌碱贿的呈火山口状，有的深达肌层；WRS结束后扣－l出腕、 出血…少，UI逐渐下阵…胃粘膜上皮结构逐浙腹，粘膜充血、 水肿咸镇至WRS结肪24h，粘膜面仅残留少量出血点，胃粘膜形态结构基 本阿羹u常M。结么bWRS可成功命限应激囹贵疡模型。应激源作用仇体时，胃粘膜病变是一个时间胸性进展、加重的脆但当应硼去椭受损的胃＊占胭给乡沟酗青咖叶自我陕复的脆 二、应淤 中胃粘膜细胞死亡形式和增殖功能的检测 guw态学角度研究 SU Mud中胃3isnlgmBW．uxmp式及书轮直功能的变化。绷原位才历林林己（TUNEL）法描砚IJ WRS jkkstg不同时间点细胞调亡的发生；于透射电铭oWM到淘胞形态的变0驾 伽…ABC法原仁杉觎不同时间点PCNA蛋白的表忒结袅1、棉大鼠胃粘膜上皮散在TUNEb细哦LWRSZhTUNEDjatHEax，rsRgR明显增引Pd．of）；WRS3．sh－删结辐o阳性细胞数量达躲删3．o－删后D，代表细腔杯死的浅染 多。WRS后shng时间涨IUNEbfatB8arffiti＆． 少，仁逐W24仍高于正常水平（Pd．05）；2、淑…姑g粘膜细胞形兹狈IJ，核形赃。而发生凋亡的蛐，有账染色体发生蹦，在核膜周边聚集彤挪月椰；有的染色体发生固缩，娜栅，核膜表面凹凸不平；有的核发生破裂，在细胞浆内矾空艄多；有的g叫夺形湘亡，1体。3、正常胃腆蝈PCNA主要在胃腺颈部靠近肾］、…中等阳性表屯W卫Z出、3．扣至WRS结束后出PCNA…少（P＜0．olX WRS结束后sh表达逐渐恢瓦WRS8folZh表达达昨明显高于和照组O卅．of X至W24表达基本恢复至正常水平0川．05）。结蚀1、应触胃粘膜细赅调亡明显增加，增殖能力下降，它们之间的失街是溃痞发生的重要原因；2、随着应激程度的撒民凋潍晚期阶段呈现坏死贱些特征3、在应激住损伤恢复的早期阶段，大量细胞凋亡跳哈可sbo动细脚驹眺必翻附；4、凋亡细胞形劫崎9＋4队 三、应逝性溃疡发虹M出准＋细胞凋亡发纺喇獭附 （一）凋饰怂困FbdFb＋L、kH阻吠私盼娜 本实验主要探讨应激性溃疡发生发展过程中，凋材目舷困BcM、F一硼…娜一的关系。用原贱妹淑U WRS结束M根胃3A5nssRFaS、Ft、BcLInRNA的表达，免痰绸附幼知IJBctw蛋白的表忒瞅l、正常对照组FaS、F旺几1llttro．ra无明显表达，Ft InRNA 3在WRS3．sh至WRS结垢sh Al6gKAsedMtl出颐阳性－中等阳性表达，但组间表达无明趾异，WRS后l1K失。E妇InRNA在WRS结束后sh－sh fohMk＆ffe＆efl出贼阳性表达，WRS跄…肖丸2、破胃粘膜组织BclAIAde白主要在胃脚呈中等阳性表达，Bax蛋白主?