丽蝇蛹集金小蜂寄主定位及气味结合蛋白分析

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丽蝇蛹集金小蜂是膜翅目的一种特异性外寄生蜂,主要寄生蝇蛹,包括丽蝇、麻蝇、家蝇等多种蝇类,是很好的蝇类生物防治物种,具有良好的发展前景。本文以丽蝇蛹集金小蜂为研究对象,结合行为学的方法探究寄生蜂触角在寄主定位中的作用以及主要的作用部位;利用分子生物学技术探究寄生蜂触角中的气味结合蛋白分布情况,利用RNA干扰技术探究气味结合蛋白在寄生蜂寄主定位及选择中的作用。1.丽蝇蛹集金小蜂触角在寄主定位中的作用采用行为学方法,探究丽蝇蛹集金小蜂对麻蝇蛹、家蝇蛹、黑腹果蝇蛹3种不同蝇蛹的偏好性。结果表明,丽蝇蛹集金小蜂对麻蝇蛹的寄生概率最高,达到68%左右;其次是家蝇蛹,达到52%左右;而对黑腹果蝇蛹的选择性最低,只有12%左右,且未发生寄生行为,三者差异显著。除此之外分析了寄生蜂定位到麻蝇蛹和家蝇蛹的时间,两者之间没有显著差异。因此,丽蝇蛹集金小蜂对于三种蝇蛹的偏好性为:最喜欢麻蝇蛹,其次是家蝇蛹,最后是黑腹果蝇蛹。为探究触角在寄主定位中的作用,通过切除寄生蜂全部或部分触角进行实验,观察行为变化情况。结果表明,切除全部触角后寄生蜂找到麻蝇蛹的概率显著降低,但时间上没有显著差异;而只切除触角鞭节部分或者1/3鞭节的寄生蜂反而搜寻到麻蝇蛹的概率增大,且搜寻时间减少,两种指标均有显著变化。2.丽蝇蛹集金小蜂触角上的气味结合蛋白初探利用定量PCR技术确定了在触角上高表达的OBPs基因,选择其中的OBP1、OBP3、OBP18、OBP26、OBP34、OBP41、OBP43、OBP76、OBP77、OBP83、OBP84、OBP90这12个基因进行RNA干扰。选择寄生后9~10天的蛹,注射的dsRNA浓度为3500ng/μl,注射剂量为30~40nl。注射两天后用定量PCR检测干扰效率。结果表明只有OBP26、OBP41两个基因的干扰效率在60%以上。在出蜂后观察这两个基因干扰后的寄生蜂,触角形态以及行为学实验均未发现显著变化。根据结果推测OBPs基因在RNA干扰效率在60%左右时不会影响表型变化。
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