背景与目的　　 随着社会经济尤其是交通的迅速发展,车祸、坠楼及工伤等诸多因为所致的脊髓损伤越来越多,由此造成的案件在法医学实践中时常可以见到。为办理这些案件,有时需要对损伤时间做出推断,但目前在法医学理论上,尚没有推断脊髓损伤时间的确切方法。且这方面的研究较为鲜见,但这一问题有时可能困扰着有关案件的侦破。　　 1992年,Reynolds等首次从成年鼠脑纹状体中发现并分离得到了神经干细胞,它能在体外持续增殖,且具有向神经元及星形胶质细胞分化的潜能。后来陆续出现了在脊髓内发现神经干细胞的报道。这一发现彻底改变了人们认为神经组织不可再生的观点,使神经干细胞的相关研究成为生命科学的研究热点之一。从发现至今的十多年间,国内外众多学者围绕神经干细胞从不同角度对中枢神经系统的发育、分化和疾病治疗等方面进行了大量的实验研究,从而对神经组织的再生能力及神经系统疾病的治疗有了全新的认识。临床相关专业对神经干细胞在各种治疗措施的干预下的增殖规律做了大量的研究,但截至目前,包括神经干细胞移植在内的临床所采取的各种治疗措施对损伤的治疗尚未取得突破性进展。　　 脊髓损伤后神经元数量减少,致使感觉和运动功能不同程度的丧失,其恢复依靠神经干细胞的增殖和分化。目前临床对脊髓损伤治疗效果令人不满,说明神经干细胞的增殖和分化受外界影响较小且个体间差异不大。这种稳定增殖的特性为通过研究神经干细胞增殖的时序性推断损伤时间提供了可行性,故本研究试图从脊髓急性损伤的大鼠在自然条件下的恢复入手,探讨脊髓内源性神经干细胞增殖的时序性,从而为从神经干细胞的增殖情况推断损伤时间提供实验依据。　　 方法：　　 1.将34只成年雌性大鼠随机分为正常对照组和试验组。采用自制Allen’s打击设备,制作脊髓急性机械性损伤模型。2.在各相应时间点前一天腹腔注射BrdU,次日心脏灌注后取出损伤段脊髓。3.观察各组病理变化；采用免疫组织化学技术检测各组大鼠脊髓BrdU及Nestin的表达情况；采用免疫荧光双标技术检测各组大鼠脊髓BrdU及Nestin的共表达情况。4.统计学处理采用SPSS10.0软件包进行统计分析,计量资料数据以均数±标准差((x)±s)表示,符合正态分布和方差齐时组间比较采用单因素方差分析、非正态分布和方差不齐时采用非参数检验,检验水准为α=0.05。　　 结果：　　 1.大鼠脊髓组织HE染色变化:对照组脊髓灰白质分界清晰,神经元细胞核仁圆形,着色均匀。各实验组出现不同病理改变:早期脊髓组织水肿、出血及坏死,后来部分修复,组织重建,最后囊腔形成。　　 2.免疫组化BrdU及Nestin阳性表达检测结果:对照组:仅见少量的BrdU及Nestin阳性细胞。各实验组:1d组二者表达开始增加；3d组表达较强；7d组表达达到高峰；14d组表达下降；28d组表达明显下降,但仍高于对照组水平,各组间比较均有统计学意义(P<0.05)。　　 3.免疫荧光双标法BrdU及Nestin共表达检测结果:同一组内BrdU+/Nestin+细胞数量仅是BrdU+细胞的一部分；各组间BrdU+/Nestin+细胞数量随时间变化规律同两者免疫组化所测规律,组间比较均有统计学意义(P<0.05)。　　 结论：　　 1.成年大鼠脊髓在机械性损伤刺激下,内源性神经干细胞发生增殖,增殖程度随时间变化呈抛物线样改变。　　 2.脊髓内源性神经干细胞增殖的时序性可试用于脊髓损伤时间的推断。　　 3.急性机械性脊髓损伤后BrdU阳性细胞中仅有一部分是神经干细胞。