论文部分内容阅读
利用废弃的纤维素类物质生产燃料酒精是解决能源危机的有效途径,但是天然纤维素类物质因其结晶结构,很难被微生物直接水解,必须进行预处理,而预处理产生的副产物会对用于发酵的纤维素酶或酵母产生毒性作用。本文根据预处理副产物的致毒机理,以还原糖和酒精产量为指标,研究了副产物的致毒作用和解毒方法。研究表明,预处理副产物在pH=4.5时,对FLZ-Y6的菌体生长抑制作用较小,而对其酶活的抑制作用较大,对FLZ-Y10的菌体生长和酶活均有强烈的抑制作用;副产物只对发酵初期的酵母生长有抑制作用,随着发酵的进行,酵母的生长恢复正常;水洗法、加大酵母接种量法、Ca(OH)2过量法三种解毒方法得到的最大纤维素酒精得率分别为63.2%、89.8%和96.7%,以Ca(OH)2过量解毒方法为最好。另外本文也讨论了一些纤维素酶活影响因素的作用。 首先本文讨论了普通培养基、PDA、阿须贝和纤维素琼脂四种保存培养基对纤维素酶活的影响。结果表明,在以纤维素为唯一碳源的纤维素琼脂培养基上保存的菌,酶活保持的最好;同时讨论了FLZ-Y6和FLZ-Y10,在编号为5#、6#、9#、12#、17#、28#、31#、33#的八种产酶培养基中的酶活情况。FLZ-Y6和FLZ-Y10均是在17#、28#产酶培养基中具有较高的酶活和在6#和33#中有较低酶活。证明氮源的种类、Mg2+的浓度、麸皮的添加量是主要的影响因素。 其次本文以FPA、CMC、CB酶活和酒精产量为指标,讨论了秸秆和麸皮比和吐温80添加量对酶活,尤其是对CB酶活的影响。结果表明,FLZ-Y6和FLZ-Y10均在秸秆和麸皮比为5:5时CB酶活最高,分别为2.428u和4.326u,麸皮对CB酶活的提高具有一定的作用,但是两株菌的CB酶活仍相对较低。FLZ-Y6在秸麸比为6:4时得到了最高CMC和FPA酶活,分别为153.3u和95.0u,FLZ-Y10在秸麸比为5:5时得到了最高CMC和FPA酶活,分别为169.0u和108.7u。最终确定纤维素菌发酵纤维素类物质的酒精产率与FPA和CB酶活都有关系。当吐温80浓度为0.05%时,FLZ-Y6和FLZ-Y10均能获得较高酶活和酒精浓度。 最后通过改变纤维素酶的用量,以乙醇浓度和纤维素二糖浓度为指标,分析了发酵纤维素产酒精的代谢途径中简单的通量分布情况,确定由纤维二糖和寡糖生成葡萄糖步的途径通量过小,导致了通量的不合理分布。而后引入外援β-葡萄糖苷酶,使接入发酵液的CMC与CB酶活比为1:1时,得到了纤维素的最高酒精得率为80.3%。