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肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)是一种多效应的细胞因子,具有抗肿瘤、抗感染和调节机体免疫等功能,其抗肿瘤作用一直备受关注,它是用以肿瘤生物治疗的第一个细胞因子。有关TNF-α的抗肿瘤作用侧重于对软组织肉瘤、黑色素瘤、肝癌、肺癌、鼻咽癌、喉癌等,而对白血病的作用研究较少。我们前期研究发现在三氧化二砷(As2O3)诱导HL-60细胞凋亡过程中伴有内源性TNF-α表达增强,而TNF-α反义硫代磷酸寡脱氧核苷酸能够抑制As2O3诱导HL-60细胞凋亡,提示内源性TNF-α在HL-60细胞凋亡过程中起驱动作用。有关外源性TNF-α在体外诱导白血病细胞凋亡的作用已有文献报道,但尚未见以白血病细胞裸鼠移植瘤为模型来研究其体内抗白血病作用的报道。本实验采用重组人肿瘤坏死因子-α(rhTNF-α),研究其在体外对HL-60细胞的作用,进一步通过HL-60细胞裸鼠移植瘤模型,研究其在体内对HL-60细胞裸鼠移植瘤的作用。 本文的研究内容主要包括: 1.rhTNF-α体外对HL-60细胞作用的研究:应用MTT比色法、集落形成试验等检测不同浓度rhTNF-α对HL-60细胞增殖能力的影响;应用AO/EB复合染色、流式细胞术和TdT酶介导的缺口末端标记(TUNEL)法等检测rhTNF-α对HL-60细胞凋亡的诱导作用。 2.rhTNF-α对HL-60细胞裸鼠异种移植瘤作用的研究:使用本研究所传代提供的高致瘤性HL-60细胞株,建立HL-60细胞裸鼠异种移植瘤模型。实验设生理盐水对照组和高、中、低三个浓度rhTNF-α给药组,每组7只裸鼠。给药方式为瘤内注射。高、中、低浓度给药组分别按每只瘤内注射rhTNF-α 2.0×104U/0.2mL、1.0×104U/0.2mL、0.5×104U/0.2mL进行给药,对照组注射等量生理盐水,每天给药一次,连续7天。末次给药后24小时,处死裸鼠。称量离体瘤