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盐渍化是作物生产中常遇到的自然逆境之一,在沿海地区和干旱、半干旱地区尤为突出,盐胁迫严重限制了植物生长,致使植物枯黄、萎蔫,严重时可导致死亡,作物颗粒无收。培育耐盐碱的作物品种是改良和利用盐碱地资源比较经济、有效的措施之一,其前提是对耐盐机制的深刻了解和耐盐相关基因的克隆及其功能研究。以耐盐性受主效基因控制的小麦品系98-160为材料,利用cDNA-AFLP技术研究了98-160盐胁迫下的基因表达变化,胁迫时间分别为0,15min,2hrs,6hrs,12hrs,24hrs和72hrs。利用约200对P/M引物组合,共得到500多条差异片段,从中随机选取233个进行二次扩增,成功扩增并克隆、测序的有112个。
利用RACE方法,成功克隆了一个小麦F-box基因的全长cDNA(TaRLK)。Southern杂交结果显示,该基因在小麦中可能为单拷贝基因。以pCHF3为基础载体,构建了TaRLK的植物表达载体。通过电子克隆结合RACE方法,克隆了小麦泛素羧基末端水解酶基因TaUCH,该基因全长3161bp,编码932氨基酸,在中部和C末端各有一个非常保守的UCH结构域。Southern杂交结果显示,该基因在小麦中可能为多拷贝基因。