【目的】
　　1.通过外显子组测序法对结直肠癌（colorectalcancer,CRC）患者体细胞单个核苷酸变异（SNVs）、插入或删除（InDel）、高频突变基因（SMGs）、拷贝数目异常（CNVs）以及异常通路富集等多个参数进行统计分析，旨在探索CRC组织中基因组的新变异。
　　2.目前维生素D结合蛋白(vitaminDbindingprotein，VDBP)及25-羟基维生素D[25-hydroxyvitaminD，25(OH)D]与CRC的关系尚不明确，通过血清学法分析CRC患者术前和术后血清25(OH)D和VDBP水平与患病风险的关系。
　　【方法】
　　1.运用Illumina第二代测序的外显子组测序法对17例CRC患者的17组癌组织及癌旁正常组织进行测序，从而探索CRC新型体细胞基因组变异。通过dbSNP138、千人基因组SNP数据库、Hapmap数据库、COSMIC已知肿瘤体细胞突变数据库和esp6500变异数据库等注释，对变异结果进行筛选及分析。而高频突变基因则使用MuSic软件进行分析。
　　2.运用酶联免疫吸附法（Enzymelinkedimmunosorbentassay,ELISA）测定血清VDBP浓度和化学发光免疫法测定25(OH)D浓度；使用Pearson相关分析方法（Pearsoncorrelationanalysis）分析CRC患者血清VDBP与25(OH)D的关系；并通过条件Logistic回归分析血清VDBP或25(OH)D作为CRC危险因素的预测价值。
　　【结果】
　　1.在17例结直肠肿瘤中发现1637个体细胞SNV位点，仅7个为多肿瘤共有SNV位点，即超过99%SNV是单肿瘤变异位点。其中位点KRASp.G12D和ZNF717p.L39V突变频率最高。另外，我们发现10个高频突变基因，包括KRAS、TP53、SMAD4、ZNF717、FBXW7、APC、ZNF493、CDR1、ARMC4和SUMF2，而ZNF717、ZNF493、CDR1、ARMC和SUMF2是新发现的CRC高频突变基因。在拷贝数异常分析中，染色体10q25.3、1p31.1、1q44、10q23.33、11p15.4和20q13.33的增加及3q21.3和3q29的缺失频率最高。
　　2.CRC患者术前和术后的血清25(OH)D浓度明显低于正常对照组（P<0.05），而术前和术后血清VDBP浓度均明显高于正常对照组（P<0.05）。肿瘤分期越高（III-IV）、淋巴结受累越多的患者术后血清VDBP水平越低。男性患者及直肠肿瘤患者术前和术后血清25(OH)D水平较高。我们的结果显示术前血清VDBP是CRC的危险因素（OR=13.264;CI=1.72-102.28;P=0.013）。然而CRC中血清VDBP与25(OH)D无相关性。
　　【结论】
　　1.新发现的高频突变基因ZNF717、ZNF493、CDR1、ARMC4和SUMF2以及染色体10q25.3的增加可能与结直肠癌的发生发展有关；高水平的独发单核苷酸变异证实了结直肠癌的高异质性；不同患者的突变基因位点可能存在显著差异，这也可能给临床治疗带来更大的挑战。
　　2.血清25(OH)D和VDBP浓度均与结直肠癌有关，且与CRC患者的临床和病理特征有一定相关性，血清25(OH)D和VDBP可能对今后CRC的发病机制的研究及患病风险的评估有参考价值，并提供更多参考数据。