论文部分内容阅读
华蟾素是以传统中药材中华大蟾蜍（Bufo bufo gargarizans Cantor）或黑眶蟾蜍（Bufomelanostictus Schneid）的阴干全皮为主要原料,经严格工艺提取而成。药理实验证明其具有抗肿瘤、镇痛及抗病毒等多种药理作用,临床应用广泛。华蟾素成分复杂,其中的水溶性及脂溶性成分均具有一定的药理作用活性。本文按照华蟾素注射剂处方,经药材提取工艺优化和乳剂处方工艺筛选制备华蟾素注射乳剂（HCSPE）,以期提高药物的稳定性,降低毒副作用,增强药物的疗效。建立了5-羟色胺的TLC定性鉴别方法;在华蟾素注射液中5-HT含量测定方法（WS3-B-3045-98）的基础上,建立了准确、稳定、操作简便的HCSPE中指标性成分含量的测定方法。以5-羟色胺含量为指标,通过正交试验优化了蟾皮的提取工艺。验证实验表明,工艺提取率高,重现性好。以外观目测法结果、离心法结果、稳定性参数Ke为指标,单因素考察油量、乳化剂、增粘剂及抗氧剂等处方因素对乳剂质量的影响,在此基础上,以精制大豆油、乳化剂及丙二醇为考察因素,以Ke为指标做正交试验筛选HCSPE最佳处方。单因素考察乳化温度、乳化时间、超声分散功率与时间、纳米机运转压力、循环次数等工艺因素对乳剂质量的影响,确定了HCSPE的最优工艺条件。HCSPE的各项理化性质表明,光学显微镜下乳滴多为球形,HCSPE的Nicomp分布强度重量径为（77.0±9.9）nm,Zeta电位为-23.7 mV,本制剂按临床使用方法稀释后得到的溶液偏高渗,pH值为5.31,粘度为3.922×10-3Pa·s。HCSPE稳定性试验表明,4000 r·min-1离心15 min,乳剂不分层;高温和光照试验提示乳剂对热较稳定,但应避光保存;40℃加速6个月、室温（25℃）留样观察6个月乳剂的各项考察指标变化不大,满足制剂稳定性要求;配伍稳定性试验结果显示与生理盐水配伍后应在2h内使用,与5%葡萄糖注射液配伍后应在4h内使用。急性毒性试验的结果表明HCSPE的LD50为209.2μg/kg,LD50的95%置信区间为206.7～211.8μg/kg。安全性试验表明,HCSPE热原检查合格,无明显血管刺激性,过敏及溶血试验合格。药效学试验结果为HCSPE≥20μg/kg时对小鼠H22肉瘤瘤质量抑制率达到26%以上,且具有一定的剂量依赖性;HCSPE40μg/kg、80μg/kg剂量能明显提高环磷酰胺所致免疫低下小鼠的廓清指数K和校正廓清指数α;HCSPE40μg/kg可明显延长小鼠对热刺激的痛觉反应时间;HCSPE20μg/kg,40μg/kg能明显延长醋酸所致扭体小鼠的扭体潜伏期,且HCSPE20μg/kg,40μg/kg,80μg/kg剂量均可减少小鼠的扭体次数。综合来看,HCSPE在抗肿瘤、调节免疫及镇痛方面优于华蟾素注射液。