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本实验应用了大鼠海马神经元原代培养、活细胞连续照像、活细胞计数、活细胞内游离[Ca2+]测定、免疫组化等方法,以Glu离子型受体激动剂L-NMDA诱发海马神经元损伤为细胞损伤模型,用JAK/STATs阻断剂PTP i-2阻断CNTF已知的经典信号转导途径,观察CNTF非经典信号转导途径的神经保护功能,并探讨其可能机制。主要实验结果如下: 1.L-NMDA（100μ mol/L,200μ mol/L,400μ mol/L,500μ mol/L）可引起海马神经元损伤反应;这一损伤反应在作用时间处于1～2hr之间时呈时间依赖性,在L-NMDA作用浓度介于0～500μ mol/L之间时呈剂量依赖性。 2.CNTF可有效抑制L-NMDA对海马神经元的损伤作用。 2.1 活细胞连续照相结果:加入CNTF（1μg/μl）5min后,再给予L-NMDA（200μmol/L）,2hr后观察到海马神经元的胞体和突起的形态无显著性变化。 2.2 活细胞计数结果:选择10个视野,将胎盘蓝染色计数结果经统计学处理,L-NMDA（200μ mol/L）组与对照组之间活细胞数有显著差异（P<0.01）;而CNTF（1μg/μl）组,CNTF（1μg/μl）+L-NMDA（200μ mol/L）组与对照组之间,活细胞数的差异无显著性意义（P>0.05）。提示CNTF可以降低L-NMDA损伤海马神经元的作用,提高海马神经元的存活率。 3.PTP i-2阻断已知的CNTF经典信号转导途径中JAK/STATs后,观察到CNTF保护海马神经元抵抗L-NMDA的损伤作用仍然存在。这一结果强烈支持在CNTF已知信号转导通路中的JAK/STATs上游,存在其它未知的作用途径,发挥神经保护作用。 3.1 活细胞连续照相结果:以PTPi-2（100μg/L）孵育海马神经元30min,再加CNTF（1μg/μl）孵育5min,然后给予200μmol/L L-NMDA,观察2hr,发现海马神经元形态无显著性变化。 3.2 活细胞计数结果:选10个视野,胎盘蓝染色计数结果经统计学处理,