鞘脂激活蛋白(SAPLIPs)在溶酶体酶解鞘脂的过程中发挥着重要的作用,从原生动物到哺乳动物都具有保守性,可能具有调节昆虫神经系统发育,维持神经细胞正常生理功能的重要作用。家蚕saposin-like (Bm-saposin-like)基因只含有saposin A和B两种结构域(缺少sap C和D),是研究saposin-1ike基因功能的理想模型。本研究克隆了家蚕saposin-like基因并进行了序列分析；采用原核细胞表达的截短蛋白制备了多克隆抗体,以特异性抗体和标签抗体结合质谱技术等检测了家蚕saposin-like蛋白前体的加工方式；研究了家蚕saposin-like蛋白在细胞中的定位和不同组织器官中的丰度；初步探索了家蚕saposin-like蛋白的功能等。相关结果如下：应用多克隆抗体通过免疫印迹技术分析Bm-Saposin-like的前体蛋白在细胞中发生的切割,结果表明有两条强带和至少5条弱带；采用质谱技术分析了切割后两条强带蛋白质的分子量。基于上述二者的结果,推测可能的剪切位点在saposin A和saposin B结构域之间。通过构建重组真核表达载体pEGFP-N1-opIE2-Bm-Sap,转染不同的昆虫细胞系,共聚焦显微镜跟踪Bm-saposin-GFP融合蛋白在不同鳞翅目昆虫细胞中定位,表明Bm-Saposin-like蛋白在胞质中呈点状分布；进一步采用溶酶体探针染色研究,结果表明Bm-Saposin-like蛋白和溶酶体共定位。免疫组化分析虫体不同组织器官saposin蛋白的表达,结果表明脂肪体中含有较丰富的saposin蛋白。在对家蚕saposin-like基因功能研究中,结果表明Bm-saposin-like没有抗菌活性和抑制神经细胞发生凋亡的功能,这可能和家蚕saposin-like蛋白缺少结构域C和D有关,saposin C和D可能是saposin蛋白的抗菌活性和调控神经细胞凋亡的重要区域。此外,采用重组杆状病毒表达系统,在不同的时间应用荧光显微镜跟踪saposin-GFP在细胞中的定位,发现Bm-saposin存在分泌型,因此推测saposin C和D结构域对于saposin蛋白的分泌不是必需的。实验结果还表明以opIE2为启动子来表达saposin-like蛋白时,在表达早期saposin蛋白可能反作用于opIE2启动子,形成负反馈Loop,进而影响Bm-saposin-like蛋白的表达。