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目的：糖尿病肾病（diabetic nephropathy,DN）是糖尿病特有而严重的微血管并发症之一。其突出病理表现为肾小球系膜病变、细胞外基质合成增多，最终导致肾小球硬化和间质纤维化。DN的病因与发病机制复杂，目前尚未完全阐明。研究显示,DN是一种低度炎症性疾病,长期高血糖造成的代谢紊乱及血流动力学改变可触发肾脏炎症反应，核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体在高血糖刺激下可被激活，活化Caspase-1促进白细胞介素IL-1β成熟和分泌，产生强大的内源性炎性反应，介导DN发生及发展。而肾组织病变所致的上皮－间充质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）在DN早期纤维化进展中起重要作用，转化生长因子β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）在DN肾脏中高表达，是EMT的关键调节因子，也是肾脏纤维化的重要标志之一。Maresin1是来源于n-3不饱和脂肪酸的脂蛋白，是抗炎促消退介质中的最新家族之一，研究已证实maresin1不仅有强大的抗炎作用，而且可通过抑制TGF-β1诱导产生EMT改善肺纤维化的进展。但是，目前maresin1对DN炎症和纤维化的相关作用尚未见报道，故本实验通过体外培养小鼠肾脏系膜细胞观察maresin1对高糖刺激下小鼠系膜细胞的保护作用并探究其可能的作用机制。 方法： 1.细胞培养及分组：体外培养小鼠肾小球系膜细胞，以30mmol/L高糖作为刺激因素，maresin1作为保护剂干预高糖作用，分别设为以下6组：（1）正常对照组（normal control group，NC组）：培养基含5.6mmol/L葡萄糖；（2）渗透压对照组（osmotic pressure group，OP组）：培养基含5.6mmol/L葡萄糖+24.4mmol/L甘露醇（渗透压约等于30mmol/L高糖组）；（3）高糖组（high glucose group，HG组）培养基含30mmol/L葡萄糖；（4）不同浓度maresin1+高糖组:1nmol/L maresin1+30mmol/L葡萄糖组（M1+HG组）、10nmol/L maresin1+30mmol/L葡萄糖组（M2+HG组）、100nmol/L maresin1+30 mmol/L葡萄糖组（M3+HG组）（5）maresin1+正常组：作用最明显浓度的maresin1+培养基含5.6mmol/L葡萄糖（6）NAC+高糖组(NAC+HG组)：高糖组预先加入10μmol/L活性氧抑制剂NAC工作液作为干预因素，了解活性氧在高糖诱导的肾小球系膜细胞的作用。 2.检测方法：(1).观察maresin1对高糖损伤肾小球系膜细胞的抗炎作用：?30mmol/L高糖刺激肾系膜细胞，RT-PCR检测不同时间点NLRP3、Caspase-1、IL-1β的mRNA表达;?不同浓度maresin1(1、10、100nmol/L)预先处理小鼠肾系膜细胞30min后，用30mmol/L高糖培养基刺激24h，用蛋白免疫印迹(Western blotting)和RT-PCR检测各组细胞NLRP3、Caspase-1、pro-Caspase-1、IL-1β、pro-IL-1β的蛋白及mRNA相对表达量，并用分光光度计和荧光显微镜观察各组细胞中活性氧（ROS)水平;③选择作用最明显浓度的maresin1干预30mmol/L高糖刺激系膜细胞培养24小时，用Western blotting、RT-PCR和免疫荧光检测各组细胞NLRP3、Caspase-1、pro-Caspase-1、IL-1β、pro-IL-1β的蛋白及mRNA相对表达量。(2).观察maresin1对高糖损伤肾系膜细胞的抗纤维化作用：①30mmol/L高糖刺激肾系膜细胞，RT-PCR和ELISA分别检测不同时间点的转化生长因子β1(TGF-β1) mRNA和纤连蛋白（FN）表达水平;②不同浓度maresin1(1、10、100nmol/L)预先处理细胞30min后，用30mmol/L高糖培养基刺激48h, RT-PCR和ELISA法检测TGF-β1的mRNA和FN的表达水平;③选择作用最明显浓度的maresin1干预30mmol/L高糖刺激培养48小时，用RT-PCR和ELISA法检测TGF-β1的mRNA和FN的表达。 3.统计学分析：数据用均数±标准差（xˉ±s）表示，应用统计软件SPSS20.0进行数据分析，各组间比较采用单因素方差分析，组内比较采用方差齐性检验，组间多重比较用LSD-t法，P＜0.05表示差异有统计学意义。 结果： 1、与正常组相比，高糖组小鼠肾小球系膜细胞ROS水平明显增加， NLRP3、Caspase-1、IL-1βmRNA表达水平呈时间依赖性增加（P＜0.05）；同时，TGF-β1和FN表达水平也明显上调(P＜0.05)，并于48h后变化达峰值； 2、与高糖组相比，maresin1呈浓度依赖性地抑制高糖诱导小鼠肾系膜细胞ROS的生成及NLRP3、Caspase-1、IL-1β蛋白和mRNA表达,且呈浓度依赖性增加pro-Caspase-1、pro-IL-1β蛋白表达(P＜0.05)； 3、maresin1干预高糖作用后TGF-β1 mRNA和FN水平表达均减少（P＜0.05），其表达随maresin1预先加入的浓度呈现递减趋势。 结论：高糖刺激可增加小鼠肾小球系膜细胞ROS产生、NLRP3炎症小体及纤维化因子TGF-β1及FN的表达,maresin1可抑制活性氧诱导的NLRP3炎症小体激活和肾脏纤维化因子TGF-β1及FN的表达。Maresin1可能具有减轻DN炎症并抑制早期纤维化的作用。