【摘 要】
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本实验的目的是研究裸DNA介导的IL-2与IL-12基因联合抑制肿瘤生成的效果,为临床实施以IL-2和IL-12为基础的肿瘤基因治疗提供新思路。本论文构建了表达IL-2基因的质粒pCMV-mIL
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本实验的目的是研究裸DNA介导的IL-2与IL-12基因联合抑制肿瘤生成的效果,为临床实施以IL-2和IL-12为基础的肿瘤基因治疗提供新思路。本论文构建了表达IL-2基因的质粒pCMV-mIL-2,对其功能进行了测试后,将pCMV-mIL-2及表达IL-12基因的质粒pCMV-mIL-12分别或同时与H22肝癌细胞混合,通过水流动力学注射法注射到小鼠体内,注射生理盐水加H22细胞和pCMVβ质粒加H22细胞作为对照。不同时间点取血,注射后7 d处死部分小鼠,观察肿瘤形成。其余小鼠用于观察生存期。结果显示,将pCMV-mIL-2注射到小鼠体内后,可在血清中检测到高水平的mIL-2及IFN-γ,其水平随质粒剂量的增加而升高。将H22细胞与质粒共同注射到小鼠体内后发现,与对照组相比,单独注射pCMV-mIL-2(或pCMV-mIL-12)后血清中可检测到高水平mIL-2(或mIL-12)及IFN-γ。而联合注射两种质粒后,三种细胞因子的水平均较单基因组明显降低。与对照组相比,pCMV-mIL-2组肝及肺内瘤结节数量明显减少,pCMV-mIL-12组和联合组未见瘤结节形成。与pCMV-mIL-2组相比,联合组不仅没有瘤结节形成,肺淤血程度也明显减轻,小鼠生存期明显延长。与pCMV-IL-12组相比,尽管两组均无瘤结节形成,且生存期也相同,但是联合组脾脏重量、髓外造血现象及肝损伤程度却明显减轻。总之,联合应用裸DNA介导的IL-2/IL-12基因,可明显抑制H22肝癌细胞在小鼠体内的生长,降低对肝、脾及肺的毒性,延长小鼠生存期。
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