目的:观察在正常及缺氧/复氧(anoxia/reoxygenation,A/R)培养条件下过表达CrkL基因对H9C2心肌细胞骨架、凋亡及增殖的影响。方法:应用CrkL基因真核表达重组质粒pCXN2-CrkL-Flag,经脂质体介导瞬时转染心肌细胞H9C2,通过RT-PCR检测CrkL mRNA的表达水平;Western Blot检测CrkL蛋白的表达水平;共聚焦激光扫描显微镜(CLSM)观察心肌细胞骨架变化;流式细胞术(FCM)检测心肌细胞的凋亡率;MTT比色法检测心肌细胞的增殖。结果:重组质粒pCXN2-CrkL-Flag转染H9C2心肌细胞后,RT-PCR和Western检测结果表明CrkL基因及蛋白能在H9C2心肌细胞中显著表达,差异有显著统计学意义(P <0.01);CLSM观察到在正常培养条件下过表达CrkL组均较空质粒组及空白组心肌细胞F-actin增粗、密集、粘着斑增多,而在A/R培养条件下过表达CrkL组心肌细胞F-actin基本正常,但空质粒组及空白组F-actin排列紊乱,稀疏,胞浆内应力纤维明显减少;FCM术检测结果显示在正常及A/R培养条件下过表达CrkL组均较空质粒组及空白组心肌细胞的凋亡率显著下降(P <0.01);MTT法检测证实在正常及A/R培养条件下过表达CrkL组均较空质粒组及空白组心肌细胞的存活力显著增强(P <0.05)。结论:过表达CrkL可使H9C2心肌细胞F-actin细胞骨架蛋白表达显著增加,凋亡率显著降低,增殖率及生存力显著增加,且过表达CrkL可显著阻止A/R诱导的H9C2心肌细胞F-actin骨架蛋白表达降低以及骨架排列紊乱,应力纤维的减少,凋亡率的增加,增殖率及生存力的降低。