山茱萸是植物山茱萸(Cornus officinalis Sieb.et Zucc.)的成熟果实去核干燥而成,属于中医临床常用于治消渴(糖尿病)的传统良药之一,被认为是中国、日本和韩国最常用的25种植物性药物之一。陕西是山茱萸的重要生产地之一,开发利用山茱萸,研究其药用成分具有重要意义。本研究运用高效液相色谱法(HPLC)来检测α-葡萄糖苷酶抑制率,替代了传统紫外-可见分光光度法,使结果误差更小,灵敏度更高,用来比较后续提取方法对山茱萸中抗糖尿病活性成分提取效果的影响;其次通过对比试验筛选出复合酶(纤维素酶,半纤维素酶,果胶酶)最佳配比以及超声波和酶解法的最佳结合方式;在单因素实验的基础上,结合Box-Behnken中心组合响应面法考察酶解温度、酶解时间、酶解pH及料液比对山茱萸提取物的α-葡萄糖苷酶抑制率的影响,优选出最佳酶解工艺;最后,探讨上述最佳提取条件下得到的山茱萸超声酶法提取物对HepG2细胞胰岛素抵抗的影响。得到的结论如下:1.通过HPLC检测α-葡萄糖苷酶的抑制率,与传统的紫外-可见分光光度法相比,操作简单,误差更小且重现性高,可将目标峰与其他干扰峰有效地分离,通过调整保留时间几乎消除了药物本身对于对硝基苯酚(PNP)峰检测的影响,从而使结果更加准确可靠,是一种更有效简便的研究α-葡萄糖苷酶抑制剂(α-GI)的方法。2.依据单因素试验,得出复合酶的最佳配比,优化了山茱萸果肉中抗糖尿病活性成分的最佳提取工艺条件,即复合酶用量分别为果胶酶:纤维素酶:半纤维素酶的配比3:1:1;结合响应面分析得到的山茱萸中α-GI的最佳提取工艺为:酶添加量0.5%,提取时间21 min,提取温度47.5℃,pH 4.9。在此条件下,α-葡萄糖苷酶抑制率高达91.99%,较单独的超声提取法、酶提法以及常规方法抑制率分别提高了 35.24%、16.87%、45.52%。3.选择葡萄糖浓度为50 mmol/L的高糖培养基建立胰岛素抵抗细胞模型,当山茱萸提取物浓度为1000μg/L时,葡萄糖消耗量为5.61 mmol/L,显著高于模型对照组(p<0.01)。通过体外细胞实验,初步验证最佳超声酶解复合法得到的山茱萸中α-GI活性成分具有显著的降糖潜力,山茱萸可以在开发新型α-GI类型的药物以及预防糖尿病的保健品中作为重要的植物性来源的备选中药材。本研究为提高山茱萸在治疗糖尿病以及开发抗糖尿病的保健品方面提供了参考。