目的：研究氟西汀（Fluoxetine）改善脑神经功能方面具有的作用与脑组织神经干细胞（neural stem cell,NSC）之间所存在的联系，进而探索氟西汀在改善修复脑神经功能方面可能存在的机制。方法：1新生大鼠神经干细胞的分离培养和鉴定：在参考已有大鼠神经干细胞分离和培养研究的基础上，本实验采用无血清培养技术，并改进实验中多项操作方法（如分离传代NSC时采用机械分离的方法,这样能保证一部分原代细胞不受胰酶损害；培养干细胞时给予一定的高密度，促进干细胞的生长增殖）,从新生大鼠海马脑组织分离培养出具有分裂增殖能力的细胞。2氟西汀刺激神经干细胞产生的影响（实验动物分组及标本检测）：将传代培养的神经干细胞分别接种于小号培养皿中，细胞浓度为(4～5)×105/ml，每个培养皿接种3ml，每组接种3个培养皿，共接种15个小培养皿，均应用无血清条件培养基培养，按氟西汀临床稳态血药浓度（500nmol/L）分别加入不同终浓度的氟西汀进行分组，分组为：①空白对照组（加入等体积的PBS作为Control组）②氟西汀低剂量组（浓度为100nmol/L）③氟西汀中剂量组（临床稳态血药浓度组，500nmol/L）④氟西汀高剂量组（1000nmol/L）⑤氟西汀超高剂量组（5000nmol/L）。分别应用RT-PCR方法和Western blot方法检测各组神经干细胞胶质源性神经营养因子GDNF和脑源性神经营养因子BDNF mRNA和蛋白的表达水平的差异。3应用流式细胞术检测各组神经干细胞胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性细胞百分率之间的差异，各种结果的差异应用SPSS13.0软件进行统计分析，P值均＜0.05。结果：1体外培养条件下从新生大鼠海马脑组织成功分离培养出具有分裂增殖能力的细胞，nestin免疫组化染色显示nestin抗原阳性细胞达到96%以上，并可以应用于后续实验。2氟西汀刺激神经干细胞后，各组神经干细胞BDNF mRNA、GDNFmRNA、BDNF蛋白、GDNF蛋白表达量均采用各组与空白对照组的倍数比(Folds of control)进行统计分析，各实验结果比较的大小分别为：（1）BDNF mRNA基本趋势是：④＞③＞⑤≥②≥①；（2） GDNF mRNA基本趋势是：④≥③＞②≥⑤＞①；（3）BDNF蛋白表达量基本趋势是：④＞③＞⑤≥②≥①；（4）GDNF蛋白表达量基本趋势是：④≥③＞②＞⑤≥①。(注≥表示P值≥0.05，两组比较不具有显著差异的两组之间的表达量的多少；＞表示P值＜0.05，两组比较具有显著差异的两组之间的表达量的多少)。3氟西汀刺激神经干细胞后，各组神经干细胞胶质纤维酸性蛋白（GFAP）阳性细胞所占百分比的检测结果(±SD)%：①空白对照组:(12.52±3.83)%；②氟西汀低剂量组:(21.73±3.37)%；③氟西汀中剂量组:(25.68±4.21)%；④氟西汀高剂量组:(35.34±4.39)%；⑤氟西汀超高剂量组:(15.14±3.16)%；基本趋势是：④＞③≥②＞⑤≥①。结论：1通过改良培养技术，采用Nestin免疫组织化学染色方法成功分离大鼠神经干细胞，并应用于后续实验。2氟西汀在一定剂量范围内可能通过促进神经干细胞上调某些神经营养因子的表达来间接促进受损脑神经的修复和再生。较低剂量（小于1000nmol/L）能够刺激神经干细胞上调神经营养因子的转录和翻译，如脑源性神经营养因子和胶质源性神经营养因子，可促进脑神经功能恢复；较高剂量（大于1000nmol/L）反而影响神经营养因子转录和翻译，对神经组织造成毒性损伤。3氟西汀可能通过促进神经干细胞分化增殖为星形胶质细胞途径促进受损脑神经组织修复和结构重构。一定剂量范围内（小于1000nmol/L）氟西汀能够促进神经干细胞高表达胶质纤维酸性蛋白，使其阳性细胞所占比率升高，促使某些神经干细胞活化增殖为星形胶质细胞。