中华鳖（Trionyx sinensis）俗称甲鱼,是中国珍贵的名特优水产养殖品种之一,具有广阔的市场前景。据2019年中国渔业统计年鉴报告,鳖类全国淡水养殖产量为319081吨。养殖过程当中,中华鳖个体表现出雌雄个体之间的生长差异,雄性个体具有更快的生长速率和更高的经济价值。目前,围绕中华鳖的性别调控开展雄性繁育生产,取得了长足的进展与一定成果,但尚未解析中华鳖性别决定分子机制。本研究以外源性激素（雌二醇和芳香化酶抑制剂）诱导性别分化作为切入点,利用RNA-Seq技术筛选性别分化相关基因,并进行q RT-PCR验证分析,研究结果可为中华鳖胚胎早期性腺的发育、性别的分化及性别调控机制提供理论依据。（1）在中华鳖的性别分化早期,使用雌二醇（17β-estradiol,E2）和芳香化酶抑制剂（Letrozole,AI）分别进行外源激素的诱导,使胚胎在外源激素的作用下进行选择性的发育。通过遗传性别的鉴定和H-E染色的组织形态分析发现,雌二醇能影响遗传雄性（ZZ）性腺组织的结构并能诱导性腺朝雌性方向发育和分化;芳香化酶抑制剂能促使遗传雌性（ZW）性腺的结构出现雄性化,能有效诱导性腺往雄性发育。同时本研究得到了伪雌性个体（ZZ+E2）以及伪雄性个体（ZW+AI）。（2）利用RNA-Seq技术对空白组（正常发育的雌性与雄性）与外源激素诱导的实验组进行转录组测序分析。其中,选择雌二醇实验组与雄性空白组做对比（X-vs-E）,而芳香化酶抑制剂实验组与雌性空白组做对比（C-vs-A）。以遗传基因的一致性为条件分别构建中华鳖性逆转阶段性腺c DNA文库。所有使用其公布的基因组序列（Pel Sin＿1.0,NCBI）作为参考进行对比。结果表明,在X-vs-E中共获得了420个差异表达基因（DEG）,其中表达上调DEG有271个,表达下调DEG有149个;在C-vs-A中共获得683个DEG,其中上调DEG有258个,下调DEG有425个。从GO功能聚类上来看X-vs-E组中较多基因主要聚类到单一生物过程、细胞过程、细胞部分和细胞;而C-vs-A中主要与细胞过程、结合、单一生物过程和细胞部分有关。在KEGG代谢通路富集结果上发现两组间的注释存在一定的差距。其中X-vs-E的DEG主要与Fat digestion and absorption、Retinol metabolism和ECM-receptor interaction途径有关。而C-vs-A中主要与Cell cycle、DNA replication和Complement and coagulation cascades途径有关。因此,分析推测在外源激素的作用下,性腺脂肪的消化吸收发生改变而在结构上达到诱导性逆转的效果。外源激素激活相关受体或性别决定上游基因而作用于下游性别调控基因和相关生物学途径,通过细胞的基本功能及代谢和DNA复制来促使性腺发育和性别分化。（3）通过实时荧光定量PCR验证差异表达基因在卵巢和精巢中的特异性,结果表明在X-vs-E中,Dmrt1、Amh、Hmga2和Acsm在卵巢中的相对表达量显著低于精巢,而Nr3c3在卵巢中的表达量显著高于精巢（P<0.05）。在C-vs-A中发现Prrx、Gatm和Ccnb在精巢中的表达显著低于卵巢,而Ppp2r5、Rsk2、Adcy8和Cpla2在精巢中的表达则显著高于卵巢（P<0.05）。q PCR表达变化趋势与RNA-seq测序分析结果基本一致。结合KEGG注释结果分析推测Rasd1、Sox17和Pax2在雌性分化中起到关键性作用,而Tbx1、Amh、Dmrt1和Cyp26a则作为雄性分化关键因子在性腺分化进程中起重要的调控作用。