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目的探讨TP53介导的糖酵解和凋亡诱导因子(TIGAR)过表达及沉默在大鼠海马神经元缺氧复氧损伤模型中对线粒体分裂的作用及其可能作用机制。方法取出生24小时以内的Wistar大鼠,用75%的酒精进行表面消毒后,在冰上断头、取脑,仔细剔除大脑表面的软脑膜及血管后获取海马组织,胰酶及DNA酶消化、离心、重悬后获得海马神经元细胞,细胞计数后种植到预先包被的培养瓶或者培养皿中。采用随机数字表法将原代培养的海马神经元细胞分为6组:正常组(N组)海马神经元细胞正常培养,每日于倒置显微镜下观察细胞正常状况,根据培养基的颜色及细胞生长情况半量换液,培养至第8天后继续正常培养,不做任何处理;缺氧复氧损伤组(H/R组)采用氧糖剥夺法构建大鼠海马神经元缺氧复氧损伤模型,缺糖缺氧6h,复糖复氧20h;TIGAR过表达组(LV-TIGAR组)将过表达TIGAR的慢病毒加入第3天的原代海马神经元中共培养3~6h,换原培养基培养至第8天,构建缺氧复氧损伤模型;过表达对照组(LV-GFP组)将慢病毒空载体如上述方法转染后进行缺氧复氧;TIGAR沉默组(LV-sh_TIGAR组)将沉默TIGAR的慢病毒如上述方法转染后构建缺氧复氧损伤模型;沉默对照组(LV-sh_Scramble组)将沉默随机片段的慢病毒如上述方法转染后构建缺氧复氧损伤模型。各组神经元细胞复氧20h后使用激光共聚焦显微镜检测各组细胞ROS的浓度,流式细胞仪检测各组细胞的凋亡率,Western blot检测各组细胞TIGAR表达量及凋亡诱导因子(AIF)、线粒体分裂相关蛋白Drp1、Fis1和Rho相关的卷曲蛋白激酶1(ROCK1)的表达。结果与H/R组相比,LV-TIGAR组的TIGAR表达量可见明显上调,而LV-sh_TIGAR组TIGAR表达量则明显下降(P<0.05),LV-GFP组以及LV-sh_Scramble组的TIGAR表达含量无明显上调及下调趋势(P>0.05)。与N组相比,H/R组、LV-TIGAR组、LV-GFP组、LV-sh_TIGAR组和LV-sh_Scramble组细胞内ROS浓度、细胞凋亡率、以及线粒体分裂相关蛋白AIF、Drp1、Fis1、ROCK1的表达水平明显增加(P<0.05);与H/R组相比,LV-TIGAR组细胞内ROS浓度、细胞凋亡率、以及线粒体分裂相关蛋白AIF、Drp1、Fis1、ROCK1的表达水平明显降低(P<0.05),LV-sh_TIGAR组细胞内ROS浓度、细胞凋亡率、以及线粒体分裂相关蛋白AIF、Drp1、Fis1、ROCK1的表达水平明显升高(P<0.05);与H/R组相比,LV-GFP组、LV-sh_Scramble组ROS浓度、细胞凋亡率、以及线粒体分裂相关蛋白AIF、Drp1、Fis1、ROCK1表达水平的差异无统计学意义(P>0.05)。结论体外海马神经元缺氧复氧模型中,TIGAR表达升高时可以通过调控线粒体分裂对神经元起保护作用,这可能与TIGAR过表达时可以抑制ROS过量与钙超载,抑制线粒体诱导的细胞凋亡途径有关。