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目的:通过药物分子设计、改性和修饰等技术,构建紫杉醇长循环纳米载药胶束PEG2000-DSPE-TPGS-PTX,并通过体外细胞实验验证紫杉醇纳米胶束载药体系对乳腺癌耐药细胞株增殖、迁移、侵袭、凋亡及细胞周期的影响,进一步探讨紫杉醇纳米胶束载药体系及其联合多肽NT21MP是否具有联合效应,并探讨相关分子生物学机制。方法:1.薄膜-水化-分散法制备紫杉醇纳米载药胶束并冻干;2.透射电镜观察紫杉醇纳米胶束形貌,采用动态光散射粒径分析仪测定胶束粒径分布和Zeta电位;3.采用低速离心法和紫外分光光度计测定紫杉醇纳米胶束的包封率及载药量,考察紫杉醇纳米载药胶束的储藏稳定性;4.采用包载荧光探针香豆素-6(Coumarin-6)的纳米胶束观察乳腺癌耐药细胞对纳米胶束摄取情况;5.采用磺酰罗丹明B(Sulforhodamine B,SRB)比色法对紫杉醇纳米载药胶束,紫杉醇纳米胶束联合多肽NT21MP对乳腺癌耐药细胞株MCF-7/PR和SKBR3/PR细胞存活率的影响;6.细胞划痕及Transwell实验检测紫杉醇纳米载药胶束、紫杉醇纳米胶束联合多肽NT21MP对乳腺癌耐药细胞迁移、侵袭能力的影响;7.流式细胞术分析紫杉醇纳米载药胶束、紫杉醇纳米胶束联合多肽NT21MP对乳腺癌耐药细胞株周期及凋亡能力的影响;8.Western blot实验检测紫杉醇纳米载药胶束、紫杉醇纳米胶束联合多肽NT21MP对乳腺癌耐药细胞凋亡蛋白、耐药相关蛋白、EMT相关蛋白水平表达的影响;结果:1.采用薄膜-水化-分散法成功制备紫杉醇纳米载药胶束,载药体系的水溶性明显改善;2.透射电镜结果显示紫杉醇长循环纳米胶束呈圆球形,粒径在30-40nm,Zeta电位为-5.4mV,3.紫外分光光度计检测并计算载药量为25.37%,并在PH7.4环境下具有一定的缓释效应。3.细胞吞噬实验表明TPGS修饰的紫杉醇长循环载药胶束相对于单药组具有更好的细胞摄取能力;4.与对照组和紫杉醇组比较,紫杉醇纳米胶束组能有效的抑制耐药细胞的增殖;5.与对照组和紫杉醇组比较,紫杉醇纳米胶束组能有效的抑制耐药细胞的迁移和侵袭;6.与对照组和紫杉醇组比较,紫杉醇纳米胶束组能够诱导乳腺癌耐药细胞凋亡,将细胞周期阻滞于G2/M期的比例最高7.与对照组和紫杉醇组比较,紫杉醇纳米载药胶束组处理乳腺癌耐药细胞后,细胞凋亡蛋白Bax、Caspase-3表达上调,抗凋亡蛋白Bcl-2表达下调;耐药相关蛋白MRP、P-gp表达水平均下调8.与对照组和紫杉醇组比较,紫杉醇纳米载药胶束组处理乳腺癌耐药细胞株后,细胞EMT相关蛋白Vimentin、Slug表达水平下调,E-cadherin表达上调;9.紫杉醇纳米胶束联合多肽NT21MP在细胞增殖、迁移、侵袭以及细胞凋亡等生物学效应更加明显。结论:1.成功构建了形貌为圆球形,粒径为40nm左右,电位为-5.4mV,存储稳定性较好,并具有一定缓释效应的TPGS修饰的紫杉醇长循环纳米胶束;2.紫杉醇长循环胶束给药系统可有效在体外发挥逆转肿瘤细胞耐药的生物学效应;3.紫杉醇长循环纳米胶束联合多肽药物NT21MP可在体外逆转乳腺癌耐药及EMT等生物学效应发挥出更好的协同效应。