大肠埃希氏菌(Escherichia coli)和大肠菌群(Coliforms)都是判断水、药品、食品等是否被粪便污染的重要微生物指标。检测大肠埃希氏菌和大肠菌群的常规方法存在耗时长、灵敏度低、特异性差和难于检测到低活性或活的非可培养菌等缺点，而基于分子生物学技术、免疫学技术、酶学技术等的三种快速检测技术具有灵敏度高、特异性强、检测快捷等优势，尤其是酶学技术的快速、经济，非常适合水产品中大肠埃希氏菌和大肠菌群的快速检测。本实验室已经建立了基于荧光方法的大肠埃希氏菌单管定量检测技术，为了进一步探讨单管定量检测技术的应用领域，满足产品上市前快速检测的需要，本文研究并建立了大肠菌群单管定量检测技术。在此基础上，用单管定量检测技术和传统方法对实验室制备的菌悬液、天然海水、水产品中的大肠埃希氏菌和大肠菌群进行了定量检测，比较2种方法的优缺点和检测结果的可比性，以评估单管定量检测技术的应用前景。具体内容如下：通过研究培养温度、培养液pH值对大肠菌群生长和培养液吸光度值的影响，确定42℃，培养液pH值7.0～7.5为大肠菌群酶解ONPG产物的吸光度值检测的最佳条件；通过研究培养时间和接种菌浓度与培养液吸光度值的关系，建立起基于分光光度法的大肠菌群单管定量检测技术。通过与平板菌落计数法和最大可能数法比较发现单管定量检测法的相对标准偏差小于这两种常用的方法，而且更为快速、经济，适合用于大肠菌群的定量检测。利用MUG单管定量检测方法和大肠埃希氏菌多管发酵法对实验室制备的菌悬液、天然海水、水产品中的大肠埃希氏菌进行了定量检测，并比较2种方法的优缺点和检测结果的可比性。检测结果表明：MUG单管定量检测法与大肠埃希氏菌多管发酵法对菌悬液、天然海水、水产品的检测结果没有统计学差异；MUG单管定量检测法检测数据的精确性高于大肠埃希氏菌多管发酵法，而且更为快速、经济，适用于海水和水产品中大肠埃希氏菌的定量检测。利用ONPG单管定量检测方法和乳糖多管发酵法对实验室制备的标准菌的菌悬液、天然海水和水产品中的大肠菌群进行了定量检测，并比较2种方法的优缺点和检测结果的可比性。研究结果显示：两种方法对菌悬液、水样的检测结果无统计学差异，ONPG单管定量检测方法检测数据的准确性、精确性和重现性都高于乳糖多管发酵法；ONPG单管定量检测法适合海水中大肠菌群的快速定量检测，具有很好的应用前景，但由于生物组织等的影响，ONPG单管定量检测方法能否应用于水产品的检测有待进一步研究。综上所述，MUG单管定量检测技术适合用于海水和水产品中大肠埃希氏菌的定量检测；ONPG单管定量检测法适合海水中大肠菌群的快速定量检测，具有很好的应用前景，但由于生物组织等的影响，ONPG单管定量检测方法能否应用于水产品的检测有待进一步研究。同时，还应该继续研究单管定量检测技术对不同地点、不同时间样品的定量检测，以拓宽其应用领域。