Aspergillus ficuum SK004产外切菊粉酶及其酶解菊粉制备高果糖浆的研究

来源 :江南大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dingchuan646
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
菊粉是由D-呋喃果糖以β-2,1糖苷键连接的多聚果糖,其还原端连接一个葡萄糖基,呈直链结构,富含于菊芋等多种菊科植物中。菊芋块茎主要成分为菊粉,其含量占干重的7080%。菊芋的生长对土质要求不严,易种植,产量较高,是制备高果糖浆和低聚果糖的极好原料。菊粉酶是水解菊粉的高效酶,微生物来源的菊粉酶通常是底物诱导性的外切酶,主要通过催化水解菊粉链的非还原性末端的糖苷键,逐一水解释放出果糖,主要产物为果糖。因此筛选高产菌株、提高水解菊粉酶的酶活在高果糖浆工业上有着重要的意义。本实验室保存的一株Aspergillus ficuum SK004无花果曲霉菌株能产菊粉酶,其混合酶系的I /S为0.43。本研究对SK004菌株进行了发酵条件的优化,确定该菌株主要产胞外酶,且主要为外切菊粉酶。优化条件为(g /L):菊粉25,蛋白胨25,NH4H2PO3 4,NaCl 5,MgSO4·7H2O 0.1,ZnSO4·7H2O 0.1,pH 6.5,30℃,200 rpm下培养7 d酶活力可稳定在56.7U /ml。将Aspergillus ficuum SK004菌株所产酶系进行分离纯化,先后通过活性炭脱色、硫酸铵分级沉淀、透析脱盐、DEAE-Sepharose CL-6B离子层析、Sephadex G-75凝胶色谱后,得到一种菊粉酶。经SDS-PAGE分析此菊粉酶为单一谱带,分子量为53665Da。本课题还对纯化后的外切菊粉酶的酶学性质进行了研究。发现该酶的最适反应温度为60℃,最适反应pH为4.5,在50℃保温1 h能保持80%的酶活,在pH 4.06.0的范围内常温放置1 h能保持90%以上的酶活。水解菊粉的Km为115.8 mg /mL,Vmax为7.80 mg/ml·min;水解蔗糖的Km为60.06 mg / mL,Vmax为7.69 mg /ml·min。以菊粉为底物,Urea、K+、Al3+对酶活的影响不大,Zn2+、Mg2+、EDTA、Ca2+、Cu2+和SDS对菊粉酶具有抑制作用,Mn2+、Li+和Fe2+对菊粉酶有激活作用;以蔗糖为底物,除Al3+有激活作用外,上述其它离子对菊粉酶都具有一定的抑制作用。通过对影响粗酶液水解速率的温度、pH、加酶量和底物浓度等四个因素的研究,确定粗酶液水解菊粉的最佳反应条件为:菊粉浓度20 g /L,反应体系pH 4.0,反应温度55℃,加酶量为25 U /g菊粉。在最适反应条件下,粗酶液水解4 h,酶解率可以达到88%,水解10 h,酶解率可以达到96%。10 h后的水解反应趋于平缓,单位时间的酶解率增加不多,最终可达到97.55%的酶解率。提出了菊粉酶酶解菊芋制备高果糖浆的工艺路线,由此路线可以得到果糖含量90%以上的高果糖浆。
其他文献
托妮·莫里森是当代美国文学界最伟大的小说家之一。她于1993年荣获诺贝尔文学奖,是当今历史上获此殊荣的第一位非裔作家和第二位美国女作家。她的第五部长篇小说《宠儿》是
本文提出了一种基于微控制器的手持式数字存储示波表的设计方案。通过高速数据采集模块TLC5510将信号数字化,以微控制器W78E516BP为核心构成系统控制和处理单元,以双口RAM ID
本文通过对日本创价学会创价理念的系统梳理,从三个时期论述了创价理念的内容和价值。一、创价理念的渊源;二、创价理念的雏形;三、创价理念的确立。在创价理念的渊源时期,创价理
安全素质作为大学生综合素质的一项重要内容日益受到人们的关注和重视。安全素质的培养和提升,客观上有赖于安全教育的普及和深入。把安全教育纳入大学生思想政治教育体系,利
目的:探讨染色体10q26上HTRA1启动子区域单核苷酸多态性(Single Nucleotide Polymorphism,SNP)与年龄相关性黄斑变性(Age-related Macular Degeneration,AMD)的关联性以及HTRA1(
多环芳烃(PAHs)是一类典型的持久性有毒物质,主要来自化石燃料和生物质的不完全燃烧。PAHs具有持久性、长距离迁移性、亲脂性和“三致”毒性,在环境介质中无处不在。其中,土壤是PA
不同的教学大纲反映出不同的语言教学理念,这些理念对教学材料选择、如何教与学有很大的影响。本文在认真分析《小学英语教学大纲》的基础上发现:《小学英语教学大纲》蕴含着
目的观察丹归消肿膏外敷对造模大鼠急性软组织损伤的消肿止痛作用。方法选取36只Wistar大鼠,随机分为模型组(A组)、辽源七厘散组(B组)、丹归消肿膏组(C组)。A组大鼠涂基质软膏,B组
大蒜为百合科葱属多年生草本植物,含有丰富的营养物质且具有抗肿瘤、保护心血管系统、降低血糖等功效。大蒜之所以具有广泛的药理作用,原因在于大蒜含有的生物活性物质-含硫
备课写教案是教师最起码的基本功,是教学过程的第一步,直接影响着教学效果的好坏。本文对备课写教案的步骤、要求和注意事项进行了系统阐述。