热疗对卵巢癌顺铂敏感性的影响及其作用机制的体外研究

来源 :天津医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dingmx2008
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目的研究常温下及41℃不同作用时间下顺铂对卵巢癌细胞敏感株SKOV3和顺铂耐药株SKOV3/DDP的生长抑制作用,检测常温及41℃不同作用时间联合顺铂下两种细胞ERCC1基因的表达水平,探讨腹腔热疗对卵巢癌细胞化疗增敏作用和逆转耐药作用,并分析其作用机制,为腹腔热疗增加顺铂化疗敏感性及逆转卵巢癌顺铂耐药提供实验依据,为减少复发和改善患者预后提供新方法。方法1MTT法研究常温及41℃不同作用时间下温热联合顺铂对卵巢癌细胞敏感株SKOV3、卵巢癌细胞顺铂耐药株SKOV3/DDP的生长抑制作用。2Western bloting法检测常温及41℃不同作用时间联合顺铂下卵巢癌细胞中ERCC1基因表达水平,探讨热疗对卵巢癌顺铂化疗增敏作用和逆转耐药作用的作用机制。结果1.热疗对卵巢癌细胞生长抑制作用。①热疗对SKOV3细胞有生长抑制作用。24h时,41℃下作用不同时间对SKOV3细胞的抑制作用不同,差异有统计学意义(F=17.806,P=0.001),41℃下作用90min较120min时抑制作用较大,差异有统计学意义(P=0.001)。48h、72h时,41℃下作用不同时间对SKOV3细胞的抑制作用不同,差异有统计学意义(F=28.951;F=29.196,P<0.001),且41℃下作用60min、90min时对细胞的抑制作用大,差异有统计学意义(P<0.001),但作用60min与90min相比差别无统计学意义(P>0.05)。热疗对肿瘤细胞的杀伤作用可持续至72小时。②热疗对SKOV3/DDP细胞生长有生长抑制作用。24h时,不同作用时间对SKOV3/DDP细胞生长抑制作用差异无统计学意义(F=3.547,P=0.068)。48h时,41℃下作用不同时间对SKOV3/DDP细胞生长抑制作用不同,差异有统计学意义(F=18.135,P<0.001),41℃作用60min、90min时SKOV3/DDP细胞的生长抑制作用较大,差异有统计学意义(P<0.01),作用60min与90min相比差异无统计学意义(P>0.05)。72h时,温度对SKOV3/DDP细胞生长抑制作用不同,差异有统计学意义(F=5.455,P<0.05)。41℃作用30min与90min、60min与120min、90min与120min相比,差异有统计学意义(P<0.05)。2热疗对卵巢癌细胞顺铂化疗敏感性的影响:①热疗联合顺铂在常温和41℃下作用不同时间,SKOV3细胞对顺铂的敏感性不同,差异有统计学意义(F=67.489,P<0.001)。在41℃90min以内,SKOV3细胞对顺铂的敏感性随控温时间的延长而增加,其中41℃60min、90min敏感性增加有统计学意义(P<0.05),且41℃90min时细胞对顺铂的敏感性大于60min时,差异有统计学意义(P=0.002)。41℃120min与常温、41℃30min、60min、90min相比差异均无统计学意义(P>0.05)。41℃90min时SKOV3细胞对顺铂的敏感性提高79.885%。②热疗联合顺铂在常温和41℃下作用不同时间,SKOV3/DDP细胞对顺铂的敏感性不同,差异有统计学意义(F=18.356,P<0.001)。41℃不同作用时间下SKOV3/DDP细胞对顺铂的敏感性增加,差异有统计学意义(P<0.001),且在90min时,SKOV3/DDP细胞对顺铂的敏感性比其他各组均增加,差异有统计学意义(P<0.001)。41℃30min与60min、30min与120min、60min与120min相比差异无统计学意义(P>0.05)。41℃90min SKOV3/DDP细胞对顺铂的敏感性提高37.129%。3热疗对卵巢癌细胞ERCC1表达的影响:在SKOV3细胞中,ERCC1表达水平较SKOV3/DDP细胞降低,差异有统计学意义(F=32.175,P<0.001)。常温、常温加顺铂和41℃不同作用时间联合顺铂时SKOV3、SKOV3/DDP细胞中ERCC1基因表达水平差异无统计学意义(F=0.962,P=0.443)。结论1热疗对卵巢癌SKOV3细胞株及其顺铂耐药亚株SKOV3/DDP细胞有生长抑制作用;2热疗联合顺铂可以增加SKOV3细胞对顺铂的敏感性,可以部分逆转SKOV3/DDP细胞对顺铂的耐药性,且最佳作用时间为41O90min;3ERCC1表达增加与卵巢癌顺铂耐药有关,但热疗联合顺铂对ERCC1基因表达水平无明显影响,热疗可能通过其他途径发挥增加肿瘤细胞对顺铂敏感性的作用。
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