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化学农药的过度使用,不仅对环境造成了污染,而且对人类身体健康造成了威胁。高效、低毒、环境友好型的生物农药的研究与开发是破解化学农药两难选择的重要途径。我国具有丰富的微生物和药用植物资源,以它们为研究对象,筛选出具有抑菌活性的微生物或植物,并对抑菌成分进行分离纯化及结构鉴定,可以为我国生物农药的开发提供先导化合物。本文对木霉的抑菌活性进行了筛选,对高活性菌株的抑菌机理进行了初步研究。另外,对花椒的主要抑菌成分在活性追踪指导下进行了分离纯化,并对其化学结构进行了鉴定。研究结果如下：1.从山东省不同地区采集土样82份,分离纯化得到23株木霉(Trichoderma)菌株,并应用对峙培养法测定了分离自山东省不同地区的23株木霉对灰葡萄孢(Botrytis cinerea)、茄链格孢(Alter naria solani)、疫霉(Phytophthora capsici)、禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)、尖孢镰刀菌西瓜专化型(Fusarium oxysporum f. sp. niveum)、尖孢镰刀菌萎蔫专化型(Fusarium oxysporum f. sp. vasinfectum)、茄类镰刀菌(Fusarium solani)和立枯丝核菌(Rhizoctonia solani)的拮抗作用。其中木霉菌株09-07的抑菌活性最好,对R.solani、B. cinerea、P. capsici和A. solani四种病原菌的抑菌率在23株木霉中均为最高,分别为69.89%、58.51%、59.42%和71.32%。这株菌主要通过竞争作用和重寄生作用来抑制病原菌。2.运用对扣法和圆盘滤膜法对具有较好抗生作用的09-05、09-09和09-22三株菌的挥发性物质和非挥发性物质的抑菌活性进行了测定。菌株09-09的代谢物抑菌活性最好,该菌株挥发性物质和非挥发性物质对八种病原菌均有活性,其非挥发性物质对八种病原菌的活性在三株菌中均为最高,对B. cinerea、A. solani、F. graminearum和R. solani四种病原菌的抑制率均超过了70%,分别为90.98%、87.85%、82.74%和74.90%。菌株09-05主要通过其挥发性物质来抑制病原菌,该菌株挥发性物质对F. graminearum、B. cinerea和A.solani三种病原菌的抑菌率均超过60%,分别为73.56%、68.24%和64.31%。菌株09-22的挥发性和非挥发性物质对B. cinerea均有一定的活性,分别为58.24%和87.84%,但是该菌株对其它病原菌的活性较低。因此菌株09-09具有进一步研究的价值。3.选取具有代表性的木霉菌株,应用形态学和分子生物学相结合的方法进行种类鉴定。结果表明,所鉴定木霉菌株均为哈茨木霉Hypocrea lixli(Trichoderma harzianum)。4.应用菌丝生长速率法,测定了花椒乙醇粗提物对8种病原菌的抑菌活性。粗提物的浓度为1g/L时,对8种病原菌的活性均超过40%。对B. cinerea的抑菌率最高,为65.49%。EC50实验表明,花椒乙醇粗提取物对B. cinerea的活性最好,EC50为212.0 mg/L；对F.graminearum的活性次之,为460.5 mg/L。依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇三种有机溶剂对花椒粗提物进行了萃取,并对各萃取物的活性进行了测定。发现石油醚萃取物的活性最高,说明抑菌活性物质主要存在于石油醚萃取物中。5.在活性追踪法的指导下,运用硅胶柱层析法和薄层层析法对花椒粗提物的石油醚萃取部分进行分离了纯化,得到代号为ZPB2b的有抑菌活性的化合物。该化合物对R. solani、B. cinerea、F. graminearum和P. capsici的ECso分别为472.3 mg/L、519.5 mg/L、678.2 mg/L和859.0 mg/L。该化合物为白色粉末状固体,不溶于水,易溶于石油醚、丙酮、氯仿、甲醇等有机溶剂。应用UV、IR、EI-MS、H-NMR和C-NMR等有机波谱方法并与文献数据比对,确定ZPB2b为2-Hydroxy-4,6- dimetboxyacetopbenone(2-羟基-4,6-二甲氧基苯乙酮)。