生物表面活性剂的菌株筛选及其降解石油烃的作用研究

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生物表面活性剂主要是由微生物产生的表面活性化合物,具有化学合成表面活性剂所无法比拟的环境兼容性及广阔的发展前景,日益受到国内外科学界的关注。丰富生物表面活性剂产生菌资源,提高其产量及对微生物降解石油烃的研究具有广泛的生物学和经济意义。因此,本文开展了生物表面活性剂方面的研究。其主要研究内容及结果如下:生物表面活性剂产生菌的选育是生产生物表面活性剂的前提和基础。本研究中用油平板法初筛,排油圈法复筛,从油泥浆中筛选出一株高产生物表面活性剂菌株BS-15。并通过形态观察、革兰氏染色、生理生化反应和16SrDNA序列分析,鉴定该菌株为铜绿假单胞菌(pseudomonas aeruginosa)。本文对菌株发酵液表面张力和乳化力进行测定,其表面张力为36.82mN/m, 5d后对柴油的乳化率达到了92%。并通过柱层析实验、薄层层析显色和红外光谱分析鉴定出该提取的生物表面活性剂为鼠李糖脂。采用响应面法对鼠李糖脂生物表面活性剂发酵培养基成分进行优化。首先用部分因子实验设计筛选出两个有显著影响的因素,分别为硝酸钠和硫酸镁结晶。然后进行最陡爬坡实验逼近最佳响应面区域,利用响应面中心组合设计确定了硝酸钠和硫酸镁结晶的最佳浓度分别为5.0 g/L和4.0 g/L。用优化后的培养基进行发酵,鼠李糖脂的产量达到25.5g/L,是优化前产量的2.45倍。本研究得到了最优的发酵培养基,为鼠李糖脂的发酵生产奠定了基础。研究鼠李糖脂对微生物降解石油烃废水的影响。菌株在32℃摇床培养120h后对石油烃的降解率达53%,在相同条件下,添加生物表面活性剂鼠李糖脂后石油烃的降解率提高了11%~20%。添加鼠李糖脂后菌株的生物量明显增多,表明鼠李糖脂能促进菌株的生长。通过设计正交实验,对影响石油烃降解的因素进行了研究。实验结果表明,影响石油烃降解的主导因子是培养时间,其次是培养温度和鼠李糖脂的添加量。同时研究了H202与鼠李糖脂协同作用对石油烃降解的影响,结果表明加入200 mg/L的H202时,石油烃的降解率从82%提高到97%。鼠李糖脂与深度氧化协同作用有助于微生物对石油烃类污染物降解效率的提高。
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