毛细管电泳拆分手性药物速差模式的开发

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毛细管电泳法是手性药物分离常用方法之一,一般在缓冲液中直接加入手性选择剂,根据其与药物手性异构体的作用不同而实现手性分离,而研发高效的手性选择剂是传统毛细管电泳技术的关键。为了突破手性选择剂的限制,我们开发了毛细管电泳速差(Velocity gap, VG)模式。这种新方法利用两个连续的电场强度使样品在毛细管中的运动过程分为第一运动相和第二运动相,通过调节第二运动相与第一运动相电场强度的比值,使手性药物两对映体间的速度差异增大。通过这种方法,手性分离的分辨率显著提高。本实验首先以特布他林为样品,在毛细管电泳上成功实现了速差效应对分离度的增加。为了证明速差模式的普适性,接着对特布他林、扑尔敏、盐酸异丙嗪进行了毛细管电泳条件的优化,通过对硫酸特布他林、扑尔敏、盐酸异丙嗪这三种外消旋体药物的速差手性分离验证了新方法的可行性。在相同的条件下(背景缓冲液、手性选择剂、有效分离长度等),样品在传统毛细管区带电泳模式下分离只能被部分分离,而在毛细管电泳速差模式下分离度大大提高,其中特布他林由1.39提高到5.26,扑尔敏由1.24提高到4.12,盐酸异丙嗪由1.21提高到4.79,且分离度还可进一步提高。实验中还对速差模式分离出的两峰纯度进行了初步验证,图谱显示速差模式分离开的两对映体峰基本无杂质存在。所有结果显示,速查模式能够提高毛细管区带电泳的分离能力,即使利用拆分能力较弱的手性选择剂也可得到很好的手性分离效果。
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