本论文主要以饲料样品为研究对象,利用高效液相色谱氢化物发生原子荧光光谱法（HPLC-HG-AFS）,对样品的提取条件进行选择,仪器的色谱条件、光谱条件进行选择与优化,分别建立硒、砷、汞三种元素的不同形态检测方法。具体研究结论如下:（1）建立了富硒酵母中硒酸[Se（Ⅵ）]、亚硒酸[Se（Ⅳ）]、硒代蛋氨酸（SeMet）、硒甲基硒代半胱氨酸（SeMeCys）和硒代胱氨酸（SeCys₂）等5种硒形态的高效液相色谱-氢化物发生原子荧光光谱（HPLC-HG-AFS）分析方法。样品采用超声探针辅助酶法,用25 mmol/L磷酸氢二铵为流动相进行等度洗脱,经PRP-X100阴离子交换色谱柱分离后用HG-AFS测定。结果显示,5种硒形态标准曲线的线性关系良好（R²≥0.9995）,方法检出限为1¹0μg/kg,方法平均回收率为85.8%¹02.5%,日内相对标准偏差≤6.1%,日间相对标准偏差≤9.6%。通过对实际样品的分析,表明富硒酵母中主要的硒形态为Se（Ⅳ）、SeMet以及少量的SeMeCys。本方法前处理时间短、方法简单、可操作性高、检测费用低、灵敏度高,适用于富硒饲料产品中硒元素的形态分析。（2）建立了饲料中亚砷酸盐[As（Ⅲ）]、砷酸盐[As（Ⅴ）]、一甲基砷酸（MMA）、二甲基砷酸（DMA）、对氨基苯胂酸（p-ASA）、羟基苯胂酸（4-OH）和洛克沙胂（ROX）等砷的7种不同形态的高效液相色谱-氢化物发生原子荧光光谱（HPLC-HG-AFS）分析方法。样品采用甲醇:水（1:1）溶液提取,15 mmol/L磷酸氢二铵和10 mmol/L邻苯二甲酸氢钾为流动相进行梯度洗脱,经PRP-X100阴离子交换色谱柱分离后,由HG-AFS测定。结果显示,7种砷形态标准曲线的线性关系良好（R²≥0.9964）,方法检出限为5³0μg/kg,平均回收率为76.3%¹08.1%,日内相对标准偏差≤7.7%,日间相对标准偏差≤17.4%。该方法能快速分析测定饲料中砷的7种形态,并具有安全无污染,检测成本低等优点,适用于大批量饲料样本中砷的形态分析,可在饲料行业推广使用。（3）建立了饲料中无机汞(Hg²⁺)、甲基汞（MeHg）、乙基汞（EtHg）3种不同汞形态的高效液相色谱-氢化物发生原子荧光光谱（HPLC-HG-AFS）分析方法。样品采用5 mol/L盐酸溶液进行超声提取,3%乙腈+60 mmol/L乙酸铵+10 mmol/L L-半胱氨酸为流动相进行等度洗脱,经Venusil MP C18色谱柱分离后,由HG-AFS测定,可在10 min内完成3种汞形态的检测。结果显示,3种汞形态标准曲线的线性关系良好（R²≥0.9976）,方法检出限为2⁵μg/kg,平均回收率为79.5%¹03.8%,日内相对标准偏差≤11.3%,日间相对标准偏差≤21.1%。本方法操作简单快捷、安全无污染、检测费用低,适用于饲料产品中汞的形态分析。