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目的:目前恶性肿瘤已成为人类主要的死亡原因之一。生物疗法有望成为继手术、化疗和放疗的第四种肿瘤治疗模式。肿瘤细胞由正常细胞演变而来,所以抗原性较弱,或抗原的特异性不强,常不足以引起有效的肿瘤反应。虽然机体有着严密的免疫监视系统,但在一定的条件下恶性肿瘤细胞可以逃避机体的免疫攻击,并且对肿瘤抗原产生免疫耐受。从而使肿瘤细胞在机体内分裂、增殖、生长、转移直至机体死亡。肿瘤免疫治疗的核心是肿瘤抗原问题。因此提高肿瘤的免疫原性,打破机体的免疫耐受,制备高效的肿瘤疫苗成为目前免疫治疗的研究热点之一。我们根据生物进化的理论,自然界生物在由低级向高级物种进化的过程中,不同种属的同类基因表现为一定的同源性,而且种属之间的同源关系越远其免疫原性越强。因此,我们设想利用种与种之间的同源蛋白质、多肽或基因进行免疫治疗,可能会克服自身的免疫耐受,并可能提高免疫原性。本试验旨在探讨一种从低等植物中提取的蛋白质是否具有肿瘤抗原活性。 方法:(1)免疫活性小淋巴细胞受抗原刺激后,细胞内DNA合成增加,向原始细胞转化。DNA的合成需要前体物质,如胸腺嘧啶(TdR)。DNA合成过程中,TdR掺入细胞量的多少与细胞增殖程度有关,从而反映细胞转化程度。肿瘤抗原能特异性刺激、活化肿瘤患者的淋巴细胞。 中文摘要据此,我们将正常人、不同分期的食管(贲11)癌患者淋巴细胞与该植物蛋白及氖矿V)标记的TdR在体外培养72,J’时后,测定各组淋巴细胞的放射性*pm值人 并计算刺激指数 旧I厂 以分析该植物蛋白是否对食管(贡门)癌思者淋巴细胞具有特异性激活作用,进而证明其是否具有肿瘤抗原活性。*氯胺一T是一种较温和的氧化剂,可将阴离子态的放射性碘氧化成分子态碘或碘阳离于,后者能与蛋白质酪氨酸残基上的氢原于发生置换反应,制得放射性碘标记物。据此原理我们制备了’hl标记的该植物蛋白免疫兔抗体。并将其注射给Lewis肺癌荷瘤小鼠,然后测定不同时段门,24h,48h,72h)不同组织的放射性,及单位组织的放射性剂量占注射剂量的百分率,来观察抗体在小鼠体内的生物学分布,证明兔抗植物蛋白抗体能否特异性结合肿瘤细胞。 结果:门该植物蛋白对食管(贡门)癌患者淋巳细胞具有特异性激活作用。对早期食管(贲门)癌、中晚期食管(贡l厂癌、正常人血淋巴细胞的刺激指数分别为3.88士 l.25、3.of士 0.75 和 l.03土 0.26。(有显著差另P<o刀5人C)”‘!示踪的兔抗植物蛋白抗体在小鼠体内生物学分布不同。单位质量的瘤组织的放射性是其它器官组织 仁心、肝、脾、肾、肌肉)的几倍不等。单位肿瘤组织的放射性剂量占注射剂量的百分率也远远高于心、肝、脾、肾、肌肉等组织,%ID/g在 12h、24h、48h和 72h分别是3.08土0.29、2.85士0.42、2.97士0.38和2.76土0.45:而其他组织(血液除外)的%ID/g的最大值为1.25士0.25。说明兔抗植物蛋白抗体能特异性结合肿瘤细胞。 2 中文摘要 结论:以上结果显示,该植物蛋白抗体具有肿瘤抗原样活性,该活性对肿瘤的早期诊断及特异性主动免疫治疗有重要意义,其抗体可望用于肿瘤靶向治疗的载体。