【摘 要】
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核糖核酸酶抑制因子(Ribonuclease Inhibitor, RI)是一种胞浆内酸性蛋白质,分子量约为50KDa。RI是核糖核酸酶A(Ribonuclease A, RNase A)的抑制剂,可以有效地抑制其对RNA的水
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核糖核酸酶抑制因子(Ribonuclease Inhibitor, RI)是一种胞浆内酸性蛋白质,分子量约为50KDa。RI是核糖核酸酶A(Ribonuclease A, RNase A)的抑制剂,可以有效地抑制其对RNA的水解作用。RI也是血管生成因子(Angiogenin,Ang)的高效抑制剂。血管生成因子具有强烈的促进新生血管形成活性,而肿瘤生长与新生血管密切相关,因此Ang的存在有利于肿瘤细胞的生长。RI与Ang结合后可以抑制Ang的促血管生成活性,从而抑制肿瘤生长。RI由含有许多亮氨酸重复顺序的多肽组成,含有这样重复顺序的一百多种蛋白质显示了广泛的功能,包括细胞周期调节、DNA修复、对细胞外基质的相互作用以及抑制酶活性等。RI定位于染色体的11p15.5,同样位于此位置的胰岛素样生长因子(IGF-2)是促有丝分裂原,它不仅是通过旁分泌与自分泌形式调节细胞生长、分化、凋亡和转化的多肽,而且是信号传导通路中重要的刺激因子。上述各种过程的失衡促使细胞增殖失控,进而导致恶变。有证据证明IGF-2在许多肿瘤细胞中可使细胞增殖增加,抑制凋亡,增加局部浸润和转移。另外有研究[27]观察到IGF-2可以直接促进脐静脉内皮细胞生成Angiogenic(血管生成素),从而促进新生血管的形成。RI与IGF-2位于人染色体同一位置附近,而具有截然相反的生理作用。故而,推测二者可能存在某种相互作用关系,并进一步探讨研究RI在信号传导中的重要生理作用,从而为RI的抗肿瘤,抗血管生成作用提供重要的理论依据。本研究的目的在于探讨真核细胞系中过表达RI对IGF-2的影响,并进一步了解二者相互作用关系,以其阐明RI抗肿瘤、抗氧化的作用机理。本试验将人核糖核酸酶抑制因子(hRI)通过逆转录病毒载体(pLNCX-RI)经过病毒包装细胞(PA317)包装后的高滴度病毒上清,感染真核细胞:人乳腺癌(MCF-7)细胞系,经G418筛选后,
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