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一.诱导兔骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的实验研究目的探讨体外成骨诱导的兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)的形态和功能特征,为骨组织工程提供理想的种子细胞。方法体外培养获取生长状态良好的兔骨髓间充质干细胞,进行成骨诱导,观察并检测成骨细胞的生物学特性。结果BMSCs可在成骨条件培养液下诱导为成骨细胞,经鉴定碱性磷酸酶和矿化结节染色阳性,激光共聚焦显微镜下成骨细胞鬼笔环肽显示骨架F-actin为红色荧光。结论骨髓间充质干细胞在体外可定向诱导为成骨细胞,有希望成为理想的种子细胞应用于临床。二.诱导兔骨髓间充质干细胞向软骨细胞分化的实验研究目的探讨兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)在体外诱导成软骨细胞的生物学特性,为骨组织工程提供实验依据。方法体外培养获取生长状态良好的兔骨髓间充质干细胞,进行成软骨诱导,观察并检测其生物学特性。结果BMSCs在转化生长因子一β1、维生素C的作用下,7天后可见细胞多变为圆形或椭圆形,并聚集形成软骨样结节,阿利辛蓝染色,蕃红花“O”-亮绿染色显示细胞内酸性粘多糖含量高,Ⅱ型胶原免疫组织化学染色阳性,PCR检测有Ⅱ型胶原的表达,表现出软骨细胞的分化特点。结论在特定诱导条件下,兔BMSCs体外可定向诱导分化为软骨细胞,为骨组织工程提供实验依据。三.兔骨髓间充质干细胞与纳米组织工程骨生物相容性的体外实验研究目的将兔骨髓间充质干细胞与纳米组织工程骨体外共同培养,观察其体外实验的生物相容性。方法将兔骨髓间充质干细胞与纳米组织工程骨体外共同培养7天,分别于1,3,7天取标本,行倒置显微镜,扫描电镜观察。结果兔骨髓间充质干细胞在纳米组织工程骨上良好的增长,繁殖。结论纳米组织工程骨有良好的生物相容性,可作为骨组织工程理想的载体材料。四.骨髓间充质干细胞复合新型纳米材料修复兔骨缺损的实验研究目的观察骨髓间充质干细胞复合新型纳米材料修复兔骨缺损的情况。方法兔骨髓间充质干细胞复合新型纳米材料植入兔标准骨缺损处,同时以单一纳米材料植入兔标准骨缺损处为对照组,分别于植入4,8,12周进行X线摄片,病理切片观察,骨密度测定,骨小梁百分比测定,生物力学测定,DSA检查等。结果两组骨缺损均能修复,但是实验组修复的时间短于对照组;同时间段的血管化程度,成骨情况均优于对照组。结论骨髓间充质干细胞复合新型纳米材料能有效地修复兔骨缺损。