氨减释菌的筛选及其对氮转化特性研究

来源 :吉林农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kenkenson
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畜禽粪便中的含氮有机物在微生物的分解代谢活动下会释放出氨气,氨气作为臭气最主要的成分,它的挥发不仅污染环境,同时也是一种氮素的浪费。本研究以减少氨气释放、提高粪便堆肥中硝酸盐氮含量为目的,从鸡粪及狐尾藻植株中分离获得28株具有氨减释能力细菌,其中菌株CN1和YX3对氨气有较强减释作用。通过进一步研究,得出以下结果:(1)菌株CN1是一株狐尾藻内生菌,革兰氏阴性短杆菌,VITEK 2鉴定及16S rRNA系统发育树表明菌株CN1与单胞菌属有99%的同源性,鉴定该菌为单胞菌;YX3分离自畜禽粪便,革兰氏阴性球菌,VITEK 2系统鉴定表明,菌株YX3与鲍曼不动杆菌的相似度为99%,并结合菌株的形态特征、生理生化特性,初步鉴定菌株YX3属于鲍曼不动杆菌,菌株CN1及YX3均不产硫化氢。(2)菌株CN1和YX3最适碳氮源均为乙酸钠与硫酸铵,且既能利用无机氮,也能利用有机氮,氮源利用范围广泛。菌株CN1和YX3的生长代谢能力随C/N比的升高而增加,在C/N比升高至20时,菌株CN1的氨氮利用率及氨氧化率分别为96.20%、91.11%,且生长代谢活性再无明显变化。YX3菌在C/N比为15时,氨氮利用率及氨氧化率分别为93.41%、86.40%,随C/N比再升高其氨氧化活性呈下降趋势。菌株CN1在低C/N比条件下的生长代谢能力要好于菌株YX3。当氨氮浓度在0-145 mg/L范围内,菌株CN1及YX3的氨氮利用率及氨氧化率随着氨氮浓度的增加而升高,当初始氨氮浓度为145 mg/L,氨氧化率都在85%以上,超过580 mg/L,菌株CN1和YX3的生长代谢受到较大抑制。菌株CN1和YX3在中性或偏碱性环境下表现出较好的生长活性及较高的氨氧化能力,CN1菌在pH为6-9时具有较好长势及氨氧化能力,YX3菌在pH为7-9时具有较高的生长活性及氨氧化能力。菌株CN1对溶解氧适应能力较强,菌株YX3的生长及氨氧化率受溶解氧影响较大,当空气体积分数由40%增加到70%,氨氮利用率由原来的72.89%增加到93.63%,氨氧化率由64.40%上升到88.44%。菌株CN1的生长受盐度影响要早于其代谢受到的影响,适宜生长NaCl浓度范围在0-4%,而氨氧化最适范围是0-3%。与CN1相比YX3菌的耐盐性较弱,在NaCl浓度为2%时保持较高的生长活性及氨氧化效果。亚硝酸盐氮作为中间产物并没有大量积累。(3)在蛋白胨液体培养基中,菌株CN1在12-48 h之间可将蛋白胨分解产生的氨氮快速转化为硝酸盐氮,降低了蛋白氮生成氨氮过程中氨气的挥发。48 h后,生长速度开始减慢并有下降趋势,最终培养液中有135.72 mg/L的硝酸盐氮积累,其氨氧化率达到91.41%,亚硝酸盐作为中间产物无大量积累现象。菌株YX3的生长及氮素转化情况与CN1菌大致相同,但氨氮转化为硝酸盐氮的速度略晚于菌株CN1,亚硝酸盐氮作为中间产物,仅在36 h出现少量的积累(0.031 mg/L)。两株菌均具有同步氨化-氨氧化能力。(4)在以乙酸钠、硝酸钠为唯一碳氮源时,只能利用少量的硝酸盐氮来满足自身细胞生长所需物质,无明显生长变浑浊现象,整个测定过程中并没有检测到氨氮和亚硝酸盐氮的存在,初步认定CN1和YX3菌无反硝化能力。(5)将菌株接种到鸡粪中去,探究菌株CN1和YX3氨减释能力,实验结果表明,菌株CN1及YX3均表现出较好的氨减释效果,与对照组相比菌株CN1使得鸡粪中氨气释放量下降90.06%,菌株YX3可使得氨气挥发量下降84.46%。
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