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冠心病(Coronary Artery Disease,CAD)是一类由遗传,环境及其之间的相互作用引起的复杂疾病,确切致病原因至今尚未阐明。多年来流行病学的研究表明,除了遗传因素以外,生活方式,饮食习惯,环境暴露等均与冠心病的发病风险相关。DNA甲基化是一种发生在DNA序列上的表观遗传修饰,可以在转录和细胞分裂前后稳定的遗传。越来越多的报道证实,高脂血症、吸烟、不良的生活习惯等心血管危险因素均可导致相关基因甲基化异常,从而促进心血管疾病的发生发展。由于研究人群的不一致及方法学的局限,以往的研究结果对于冠心病患者外周血白细胞DNA总体甲基化水平的变化情况没有取得一致的认识。本课题研究第一部分,共收集外周血样本435例(215例冠心病患者,220例健康对照),利用色谱-质谱联用技术检测外周血白细胞DNA总体甲基化(5-mdC/dG,m6A/A)水平,并用荧光定量PCR技术检测了3个DNA甲基化转移酶(DNM1,DNMT3A,DNMT3B)及3个脂代谢相关基因(SREBP-1,HMGCR, MLXIP)mRNA的表达水平,通过统计学检验两组样本之间甲基化水平及基因表达水平的差异。第二部分,建立THP-1泡沫细胞模型,利用色谱-质谱联用技术检测单核细胞泡沫化前后DNA总体甲基化水平的改变情况；在THP-1泡沫细胞中转染DNMT1全长质粒,采用质谱法检测SREBP-1启动子区域甲基化水平的改变情况,并通过荧光定量PCR,Western Blot技术检测脂代谢基因SREBP-1 mRNA及蛋白表达情况。第三部分,共收集外周血样本954例(476例冠心病患者和478例健康对照),依据Haploview软件提供的SNP连锁图挑取5个DNMT1 tag-SNP位点(rs2228611, rs16999593, rs7253062,rs2336691, rs4804494)。采用高分辨率熔解曲线法(HRM)检测样本中此5个SNP位点基因型,并通过统计学检验分析两组人群中5个位点及单体型的分布差异情况。该课题第一部分主要研究发现：1)研究中健康汉族人群外周血白细胞样本DNA总体5-mdC/dG水平和年龄,外周血清总胆固醇水平呈负相关；2)冠心病患者外周血白细胞基因组5-mdC/dG含量显著低于对照人群,总体5-mdC/dG含量降低是冠心病的潜在风险因素(odds ratio(OR)=2.454,95% confidence interval(CI)=1.665～3.617,校正P=5.789×10-6)；患者外周血白细胞基因组m6A/A含量显著高于对照人群,m6A/A含量增高是冠心病的潜在风险因素(OR=0.655,95%CI=0.448～0.957,校正P=0.029)；3)冠心病患者外周血白细胞DNMT1 mRNA表达水平显著增高,SREBP-1 mRNA表达水平显著降低。4)THP-1单核细胞泡沫化进程中基因组总体甲基化水平(5-mdC/dG, m6A/A)显著降低,DNMT1表达水平降低；5)THP-1泡沫细胞转染DNMT1全长质粒后,SREBP-1启动子特定CG位点启动子甲基化水平增高,SREBP-1 mRNA及蛋白表达水平降低。6)DNMT1基因上两个多态性位点(rs2228611和rs2336691)的基因型与CAD的患病风险有关联；7)rs7253062与脂质代谢相关；8)在单体型分析中基因型G-T-A-A-T(等位基因顺序依次为：rs2228611, rs16999593, rs7253062, rs2336691和rs4804494)与CAD的患病风险相关联。本研究提示DNA甲基化调控在冠心病的发病机制中扮演了重要角色,外周血白细胞DNA整体甲基化水平减低可能是冠心病的潜在风险因素；冠心病病理进程中的重要步骤-单核细胞的泡沫化受到了甲基化的调控,脂质代谢基因SREBP-1启动子区异常的甲基化改变了该基因的正常表达；DNMT1的基因多态性与冠心病关联。