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目的:探讨蚓激酶抗脑缺血作用的机制。
方法:通过制备大鼠大脑中动脉阻塞致缺血模型,采用酶联免疫吸附实验、RT-PCR实验研究尾静脉给予蚓激酶粉针对大鼠血小板内环腺苷酸和环鸟苷酸含量、腺苷酸环化酶和鸟苷酸环化酶活性、酪氨酸激酶1/信号转导子和转录活化子1通路表达的影响;采用分光光度法、RT-PCR、western blot方法、流式细胞术检测蚓激酶对凝血酶刺激后血小板内钙离子浓度变化、人脐静脉内皮细胞黏附分子-1表达以及人血小板膜糖蛋白ⅡB/ⅢA和P选择素表达的影响。
结果:蚓激酶显著增加大鼠大脑中动脉阻塞模型血小板环腺苷酸含量,潜化了血小板腺苷酸环化酶的活性,而对环鸟苷酸含量、鸟苷酸环化酶活性没有影响,同时激活损伤部位的酪氨酸激酶1/信号转导子和转录活化子1通路发挥抗细胞凋亡作用;在体外,抑制凝血酶诱导的血小板内钙离子浓度的增加,降低人脐静脉内皮细胞黏附分子.1的表达,减弱人血小板膜糖蛋白ⅡB/ⅢA和P选择素的表达。
结论:蚓激酶抗脑缺血作用的机制可能为以下几点:升高环腺苷酸含量、抑制细胞内钙释放产生抗血小板活化的作用机制;抑制人脐静脉内皮细胞黏附分-1的表达产生抗血栓作用的机制;激活酪氨酸激酶1/信号转导子和转录活化子1通路产生抗凋亡作用的机制。