鹿蹄草中两种主要黄酮苷的提取工艺及抗氧化活性研究

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本文建立了对鹿蹄草中两种主要黄酮苷类化合物的高效液相检测方法,并首次对鹿蹄草中两种黄酮苷类化合物金丝桃苷和2"-O-没食子酰基金丝桃苷的负压空化-微波提取工艺进行了研究。同时,对鹿蹄草粗提物以及各层提取物进行了系统的抗氧化活性评估。1、确定了高效液相分析检测鹿蹄草中两种主要黄酮苷类成分的色谱条件:色谱柱:HIQ Sil C18W(250mm×4.6mm,5μm),流速:1mL/min,柱温:30℃,检测波长:254nm和265nm,进样量:10μL。流动相体系为(A)乙腈-(B)含0.5%的甲酸水溶液(v/v),梯度洗脱为:0-8min3%-5%A,8-10min5%-18%A,10-32min18%-25%A。2、对负压空化-微波提取鹿蹄草中金丝桃苷和2"-O-没食子酰基金丝桃苷的条件进行了优化,对影响提取率的各因素进行了考察,确定了最优负压空化-微波提取工艺参数:提取溶剂:体积分数50%乙醇溶液原料粒径:50目液固比:30:1提取温度:55℃负压压力:0.06MPa提取功率:500W提取时间:15min在上述优化的条件下对鹿蹄草进行提取,金丝桃苷和2"-O-没食子酰基金丝桃苷的平均提取率分别为:1.258和4.911mg/g。3、研究了鹿蹄草粗提物及各层提取物的抗氧化活性并进行了皮尔森相关性分析:在DPPH自由基清除实验中,鹿蹄草粗提物和乙酸乙酯层的DPPH自由基清除能力较为突出,粗提物和乙酸乙酯层的IC50值分别为0.063和0.122mg/mL; ABTS自由基清除能力最强的是鹿蹄草粗提物,相当于0.627mmol/gTrolox,其次是乙酸乙酯层、正丁醇层、石油醚层和水层;还原能力结果表明乙酸乙酯层IC50值为0.066mg/mL,是对照BHT的两倍,说明乙酸乙酯层具有相当强的还原能力;β-胡萝卜素漂白能力测定结果为粗提物和乙酸乙酯层的IC50值分别为0.029和0.027mg/mL,与对照品BHT的IC50值(0.021mg/mL)接近。皮尔森相关性分析表明鹿蹄草的抗氧化能力与其总黄酮含量相关,四种抗氧化活性(DPPH、ABTS、还原能力、p-胡萝卜素漂白)之间有显著的相关性(p值大于0.08)。
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